用荧光图像可视化系统对神经节苷脂构效关系特征地研究.pdfVIP

中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集 2·005 用荧光图像可视化系统对神经节普脂构效关系特征的研究 刘长锁 陈乃宏. (中国医学科学院协和医科大学 药物研究所〕 天然存在的神经节昔脂(Ganglioside)是一类含有唾液酸的鞘糖脂。主要存在于脑 中，尤其胎儿和新生儿脑中高浓度存在。较早的研究表明(Brain,Res,345,159-1641985; Exp.BrainRes,123,307-3141988)，神经节昔脂不仅与神经细胞生长、发育、突触形 成、神经递质的分泌、UP的诱导等有重要关系，并且可促进神经损伤再生，但作用机 理不清楚。临床研究表明，与正常老人相比，痴呆患者前头叶、基底核等处神经节昔脂 GM,GTlb,GD1b等的含量明显减少 (JDev.8io1,35,289-295,1991)。最近的研究表 明痴呆患者脑组织 内可见鞘糖脂减少，神经酞胺量增加等明显特征 (Proc.Natl.Acad.5ci.USA101,2070-2075,2004)此外，癫痛模型鼠表现神经节昔 脂合成酶的异常 以Neurochem.双 1185-1193,2001),神经节普脂与GBS症的关系等 (Ann.Neural.砚 626-631,2000;Ann.Nerual.残 383-388,2003)均引起神经 药理学及神经科学领域的重视。近年搪链合成酶基因相继被克隆，及糖链合成酶去基因 鼠模型 (神经节普脂合成异常)所表现出的神经系异常症状，进一步证明其与神经系病 变上的重要关系。最近国外又提出“神经糖链生物学”的概念(TannbakuAakusannRousou 49,2285,2004)，神经节普脂在神经退行性病变防治方面的有极大的的前景，但神经 节普脂的作用机制仍不完全清楚。 以往为了研究活神经细胞蛋白激酶的活性变化，我们独自开发了可观测神经细胞内 CaMKII,PKA等重要蛋白激酶的活性变化图像可视化系统，并对某种结构特征的神经节 昔脂 (GDlb,GTlb等)与一些生物学活性的关系进行观察测试，并用负基因优位变异 (dominantnegative，简称DN)调控技术相结合，明确7这类神经节普脂诱导神经细 胞filopodia形成，神经细胞形态改变的主要机制及相关信号传导通路，同时，我们还 通过对人工合成的哺乳类成年动物体内天然不存在的神经节昔脂衍生物;如Ga1NAc多 聚体、NeuAca-6Glc)3r1Cer(GM;衍生物)的构效特征和活性规律进行了研究，用 DominantNegativemutant调控技术、基因荧光探针转染、和开发的活神经细胞内蛋 白激酶活性可视化技术等，从不同角度对部分神经节昔脂的药理作用进行了观察。结果 表明;1、部分a系列和b系列均有快速诱导actin的再聚合、促进突触形成、增强神 经细胞突触可塑性的作用.从而来维持和提高神经机能活动。2,a系列神经节普脂中 的GM2、和Ga1NAc多聚体、主要是通过激活神经细胞内蛋白激酶PKA来调节细胞的功 能。3、而b系列神经节昔脂GTlb,GDIb等的主要作用机理是通过其激活神经细胞内 蛋白激酶CaMKII和下游的cdc42蛋白激酶磷酸化、来激活信号传递系统。figf.z,s.ai .以上研究内容受到以下基金项目资助:1、国家自然科学基金课题 资助.2,国家重点基 拙研究发展计J(973)项目子课题(2004CB518906)资助. chennh@imm.ac.cn 中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集-.2005 本次会议将就以上研究结果加以介绍。 参考文献 Chen,N.,S.Furuya,H.Doi，丫Hashimoto,Y.Kudo,AndH.Higashi(2003)anglioside/Calmodulin kinase11signalinducingCdc42-mediatedneuronalactinreorganization.Neuroscience.120,163.176. ZOC3) Chen,N.,S.Furuya,Y.Shinoda,M.Yumoto,人M ake,K.Sato,H.Doi,丫Hashimoto,YKudo,andH Higashi (2003) Exrtacellular car