生物胺和细菌作用的微量量热法研究.pdfVIP

192 JPharmAnal 药物分析杂志Chin 2003，23(增刊) 生物胺与细菌作用的微量量热法研究4 孙玉希 于游 卢海峰 张洪林 (曲阜师范大学化学科学学院曲阜273165) 利用微量量热法研究药物对细菌的作用具有独特的优 胺中的生长热谱图形状类似，曲线斜率不尽相同。本文选取 势¨j。用热活性检测系统连续测定细菌代谢过程的热量变 泵入混悬液后相等的一段时间(选取50分钟)作为诱导期。 化，可获得反映细菌代谢规律的完整热谱曲线，若在培养基 在研究药物对大肠杆菌生长过程的影响时，以第一个生长峰 中加入药物，则热谱曲线就反映了细菌在药物作用下的代谢 表现出来的动力学特征来表征大肠杆菌对生物胺的识别规 情况。本文用2277型热活性检测仪测定了不同浓度的生物 律。图1只绘出了大肠杆菌在不同浓度乙胺作用下第一个 生长期的热谱曲线。 胺对大肠杆菌的热功率一时问曲线即P。一t曲线，用Malthus 生长模型呤。处理曲线得到了生长速率常数，并用计算机拟合 出非线性方程，确定了大肠杆菌对生物胺的识别规律。 l实验部分 堇 1．1实验仪器本实验采用瑞典AB公司生产的2277型热 r 活性检测仪，样品通过2132蠕动泵泵人流动池，配以digitam 数据采集程序。实验称量用Sartorius公司生产的BS210S型 单盘电子天平。 1．2试剂36％乙胺，化学纯(北京化学试剂公司)；正丙 胺，化学纯(北京化学试剂公司)；正丁胺(n—Butylamine)，图1乙胺对E．Coli的代谢作用的P。一t曲线 分析纯(北京化学试剂公司)；正戊胺，≥97％(Fluka)；正庚 按照Malthus生长模型拉。处理各曲线，得到了各生物胺 胺(，≥98％(Fluka)；正辛胺，≥98％(MERCK—Schu— 不同浓度下生长速率常数。得出同一生物胺随着浓度的增 chardt)；正癸胺，化学纯(北京市旭东化工厂)，水为Mlli—Q 纯净水，其他试剂皆为分析纯。 加，抑菌作用增强，在较高浓度时对大肠杆菌的生长都有抑 大肠杆菌由山东省卫生防疫站提供。 制作用；随着碳链的增长，生物胺抑制细菌生长的有效浓度 采用牛肉膏液体培养基o。 降低，表明其相应的抑菌活性增强；低碳生物胺在低浓度时 1．3生物胺药品的配制准确称取各种生物胺，加入适量 对细菌生长表现出一定的促进作用。用计算机对生长速率 常数与浓度数据进行拟合，获得了大肠杆菌与生物胺作用的 水，用0．2mol／L的HCl调节pH=7．2，然后用水定容于 灿一c方程式见表1，并且进一步得到各生物胺有效抑菌浓 10mL的容量瓶中，最后在121℃下蒸汽灭菌30min，冷却后 置于冰箱中备用。 度见表2。由表2得出；在我们讨论的浓度范围内，根据假 1．4实验方法实验采用停流法¨o。 定标准，乙胺抑菌作用不明显，其它生物胺的抑菌作用随着 2结果与讨论 碳链的增加呈指数下降，以有效抑菌浓度c有效对相应生物 本实验测定了310K时，大肠杆菌在不同浓度的生物胺 胺分子量M。。拟合得出方程式为： R=0．9968 中生长的热功率一时间曲线。实验表明大肠杆菌在各生物 C右特=78．28exp(一0．00373XMB