人乳头瘤病毒结构蛋白与其疫苗的研究进展.pdfVIP

27、人乳头瘤病毒结构蛋白及其疫苗的研究进展 黄秋穗 温州医学院附属二院(325027) 由人乳头瘤病毒(Human 发现HPV有100多种型别，根据HPVDNA的检测和流行病学资料，分为高危型别和低危型别，高 HPVll型。低危型别HPV6、HPVll感染主要引起尖锐湿疣，而高危型别HPVl6、HPVl8感染与宫 颈癌发病密切相关。尖锐湿疣在我国发病率呈逐年上升，有些地区发病人数占全部性传播疾病人数 的20％左右，跃居STDs发病的第二位；宫颈癌则为女性生殖道恶性肿瘤重最常见的肿瘤，严重威 胁我国育龄妇女的生命健康，目前，仍缺乏有效方法来预防和治疗HPV感染及其相关肿瘤如尖锐湿 疣及宫颈癌。研究者正在试图通过研制HPV疫苗来达到防治HPV感染及其相关肿瘤的目的。目前， HPV疫苗的研究主要包括病毒样颗粒疫苗、多肽疫苗、载体疫苗和核酸疫苗等。本文就HPV结构 蛋白疫苗研究作一综述。 1．HPV结构蛋白的基因结构 000 HPV是直径为55nm、约有8 bp的小DNA病毒，由环状双链DNA形成的20面体对称的 无包膜病毒，在氯化铯中浮密度为1．349／ml。其基冈组分为3个区：E区、L区和非编码区(URR)， 调节基因转录。 2．HPV病毒样颗粒疫苗 HPV LI或L1+L2在真核细胞表达后可自行组装成不含DNA的病毒衣壳，命名为病毒样颗粒 (viruslike 行大规模制备、纯化。因VLPs不含病毒核酸，因此无潜在的致癌危险性，作为疫苗安全可靠。HPV VLPs免疫动物后可诱导机体产生高滴度的中和性抗体和粘膜局部的IgA抗体，可保护实验动物免受 同型HPV的攻击。在Ll羧基端插入60个外源性氨基酸，不影响其自身性能并装配形成VLPs。L2 衣壳蛋白能与Ll蛋白结合，形成VLPs，即使是长异源序列也被连至它本身的C末端，所连接的氨 基酸可长达391个。Ll和L2共表达不仅可增加中和抗体的滴度，而且可提高病毒样颗粒的产量， 提高VLPs的装配效率，而且可能增加有关的抗原表位以便获得较强的局部粘膜免疫和系统的体液 免疫和细胞免疫反应。因此，以Ll和L2为保护性抗原构建的疫苗很可能在预防HPV感染及其相 关肿瘤方面发挥着重要作用。 3．VLPs的抗原表位的研究 VLPs上的抗原表位决定了其免疫原性与抗原性，VLPs上的抗原表位包括中和表位和CTL表位。 中和表位包括线性中和表位和构象性中和表位。线性表位在氨基酸排列上呈线状结构，而构象性表 ·146· 位并不象线性表位那样在氨基酸排列上是连续的，它由不连续分布在线性氨基酸序列上的氨基酸残 基组成，只有正确的蛋白质折叠结构或VLPs完全组装后这些氨基酸残基才相互靠近而形成抗原表 l 位。研究表明，构象性中和表位的抗原性比线性中和表位强。HPVI Ll上的F50、A266和氨基酸残基282即构象性表位。构象性表位的特定氨基酸被其他氨基酸代替后 可导致抗原性的明显下降，如HPVIlLl上的Y246或G278被其他氨基酸代替后可导致中和性MAb 结合能力的明显下降或消失。线性中和表位主要有HPVll l aa49．54、aal69．178，HPVl6的aal1．130、174．185等。虽然线性中和表位的免疫原性没有构象性中 和表位强，但是由其构建的疫苗足以保护人体免受HPV感染。各个型别HPVVLPs的中和表位有交 叉免疫反应性。有关HPVVLPs的CTL表位的研究报道较少，位于HPVl6L1上的aal65．173为CTL 表位。由CTL表位构建的疫苗可以诱导Ll特异性的CTL反应并且可以导致肿瘤的消退。 4．VLPs作为抗原释放系统的研究 virus．1ike HPV嵌合VLPs(Chimeric L2末端经克隆表达形成的疫苗，能通过抗原递呈细胞将异源蛋白通过MHC．I途径递呈给CD8+细胞， 诱导CTL反应，保护机体免受肿瘤细胞的攻击。乳头瘤病毒Ll蛋白由500个氨基酸组成，可在其 L1羧基端形成抗原释放系统的异源蛋白 羧基端插入一些外源性