人胎脑动脉发育相关基因表达谱地研究.pdfVIP

首届中国中青年神经外科医师论坛论文汇编 基础与交叉学科 讨论 神经干细胞存在于成年动物的脑室下区和海马区，胚胎发育期的大部分脑组织结构中均存在神经干 细胞，从这些组织中分离出的细胞在体外bFGF和／或EGF的刺激下可以持续分裂和增殖“…。神经干细 胞这个概念包括3层含义：①能产生神经组织，来源于神经系统；②有自我更新的能力；③通过非对称性 的分裂产生它们自身以外的细胞…。我们从胚胎的脑组织中成功分离培养出神经干细胞，这种培养细胞 的绝大多数表达巢蛋白，正象Carpenter【41等研究中提到的那样【4]。巢蛋白是一种中间丝蛋白，常作为一 种前体细胞的标志物。培养的神经干细胞也表达波形蛋白，波形蛋白是间充质细胞的主要的中间丝蛋 白，常用于对未分化肿瘤的鉴别诊断，它也可作为神经千细胞的标志物用于对神经千细胞进行鉴定：a,9j。 巢蛋白和波形蛋白阳性细胞仅见于悬浮培养的神经球和贴壁堵养的聚集的细胞团中，如果细胞孤立不与 其它细胞接触，最终要终末分化为神经元和胶质细胞，波形蛋白和巢蛋白的表达停止。神经干细胞对密 度较敏感，保持干细胞的属性，必须维持一定的密度。克隆试验没有成功，因为单个细胞停止分裂，不能 形成文献中描述的典型的神经球”1。NSCs能够分化为中枢神经系统的3种基本的细胞：神经元、星型胶 质细胞和少突胶质细胞。因此我们认为这些细胞可以称为神经干细胞。 人类神经前体细胞移植到胚胎大鼠的侧脑室后，移植的细胞广泛地结合到大鼠的脑组织内，形成嵌 台脑。移植细胞广泛分布到端脑、间脑和中脑等部位。我们的研究与小鼠一太鼠嵌合类似”j，在移植后 3个月以内，未见到免疫排斥反应，证明胚胎大鼠对异种来源的神经细胞移植是免疫耐受的。在培养基 中体外长期培养扩增的神经前体细胞移植以后，仍具有在异种胚胎脑组织内移行的能力，提示这种细胞 在移植治疗疾病中有广泛的应用前景。在移植的时候，不必在损伤的多个部位移植细胞，仅根据需要选 用几个位点移植，细胞就可分布到更广泛的部位，达到大面积修复、治疗疾病的目的。我们的实验也证 明，携带外源基因的腺病毒载体转染的神经前体细胞移植到脑内可以稳定表达外源基因长达1个月．提 示这种细胞不仅是进行体外细胞分化和命运决定的重要的细胞来源，而且可以作为基因治疗的一个很好 的载体Ⅲ1。 胚胎脑室内移植能够使人类的细胞更多地分布到大部分脑的部位，人类细胞在移植后的分布和嵌合 方式啮齿类动物神经细胞相似”1。这种相似性提示细胞的移行不是由于细胞自身的性质决定的，而是由 宿主脑内的外部信号引导的。人类供体细胞对啮齿类动物脑内的移行信号发生应答，说明这种信号在不 同种属之间的高度保守性。 将人类来源的细胞用基因转移技术标记，这种嵌合模型可以用来研究调节人类神经细胞移行和分化 的分子机制”“，也可以将人类的细胞移植到过量表达的对神经移行和分化有作用的神经营养因子的转 基因鼠的胚胎中，这种策略可用于研究活体中神经营养因子对人类神经细胞的作用。对于研究细胞替代 治疗的设计和人类中枢神经系统基因治疗的效果都有很大的意义。这种嵌合模型没有创伤和反应性的 变化，是进行体内研究的良好的工具，从患有神经系统疾病的病人体内获得的神经细胞移植到发育期体 内，可以用来研究神经疾病的病理机制和药物对人类神经元和胶质细胞的作用。 人胎脑动脉发育相关基因表达谱的研究 中山大学附属第一医院神经外科(广州，510080) 李明昌 石忠松 夏之柏 黄正松 国家自然科学基金资助项目30370409) 广东省科技计划项目(C31201)资助项目 胚胎及胎儿期是机体发育过程中最为重要的环节，各种先天性畸形或缺陷多在此期形成。研究该时 期的组织或器官基因表达谱的变化，不仅有助于阐明组织和器官的生长发育规律，而且能为揭示相关疾 首届中国中青年神经外科医师论坛论文汇编 基础与交叉学科 649 病的病因和发病机理提供新的思路“挂而为疾病的防治提供线索川。脑动脉是脑组织营养和氧份的供应 通道，由其发育异常而形成的多种疾病如脑动脉瘤等，临床病情严重但无有效的防治手段，很大程度上与 其发病机制未完全阐明有关‰本研究应用基因芯片技术，在全基因组水平对人胎脑动脉的基因表达谱进