COPD急性加重期模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶的变化及其中药通塞颗粒对其作用.pdfVIP

·134· 全国中医．中西医结合防治老年病暨老年心血管病诊治规范学术大会 COPD急性加重期模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶的 变化及中药通塞颗粒对其作用 李建生 李素云 王又红(河南中医学院老年医学研究所 河南 郑州450008) 关键词 阻塞性肺疾病基质金属蛋白酶中药 1．4动物给药于造模第17周的第1天，空白对照组和模型 慢性阻塞性肺疾病(COPD)的反复急性加重是导致其肺功 组给以灌胃生理盐水，每日2次。通塞颗粒高剂量组、通塞颗粒 能恶化的主要原因，细菌反复感染促进COPD相关肺损伤和l临低剂量组、西药对照组、中药对照组分别给以中药通塞颗粒(59 床症状[1]。基质金属蛋白酶(MMP)在肺组织细胞外基质损伤 中起者重要作用[2’3]。因此，我们以细菌感染方法复制COPD模 型，并在此基础上，以短期、反复、高剂量经鼻腔滴入细菌的方 法建立COPD急性加重期模型(另文发表)，探讨COPD发生发2次。给药时间为土周，自造模17周结束后，开始取材。 展过程中MMP的变化意义及中药复方通塞颗粒对其影响。以 1．5取材与指标测定动物放血处死后。右肺上叶与下叶迅速 为揭示COPD的病理生理和中药通塞颗粒的作用提供依据。 1材料与方法 1．5．1 白提取：低温匀浆肺组织，4℃离心，取上清液，提取蛋 1．1动物Wistar大鼠由河南医科大学动物试验中心提供，体白，用紫外吸收测定蛋白含量。 重185～2209，雌雄各半。 1．5．2酶谱方法：加蛋白样于3％浓缩胶。8％分离胶(含1％ 1．2细菌 自COPD患者痰液中分离、经河南省医学检验中 心细菌研究室鉴定的肺炎克雷伯杆菌(klebsiellapneumoniae)， 根据河南省医学检验中心细菌研究室常规方法培养保存细菌。 用前将细菌浓度调整为6×108CFU／ml、18×10“CFU／ml。 1．3模型制备Wistar大鼠100只，其中对照组10只，COPD 稳定期模型组(稳定期模型组)和COPD急性加重期模型组一9酶消化区透明清晰为止。 (急性加重期模型组)、通塞颗粒高剂量组(以下简称高剂量组)、 通塞颗粒低剂量组(以下简称低剂量组)、西药对照组、中药对 析系统进行透光度测定，计算各条带的酶单位U(条带透光度 照组各15只。参照许浒COPD模型建立方法[2]制作COPD稳 一背景透光度)×面积mm2／10#g蛋白。 10．0for 定期模型，于16周结束后，在此模型基础上，于第17周的第41．6统计学处理数据采用SPSS Windons统计分析软 天经鼻腔注入大剂量肺炎克雷伯杆菌(18×10”CFU／ml，经预件，计量资料用F检验。 实验确定)，每天2次，每次0．3ml，连续滴细菌4天。进行有 关项目检测。上述模型成功率为85％～90％。对照组大鼠经鼻2结果 腔注入细菌常规培养液0．1ml，每周2次，持续16周。 各组肺组织MMP一9、MMP--2的变化见表1、表2 表1 各组大鼠肺组织MMP--9的变化(i±s) 与中药对照组比较’O．05，PO．01：与西药对照组比较Opo．05，OOpo．01 全国中医、中西医结合防治老年病暨老年心血管病诊治规范学术大会 ·135· 表2各组大鼠肺组织删P一2的变化(i土s) 与中药对照组比较+PO．05，一PO．01}与西药对照组比较oPo．05，ooPo．01 中医认为COPD急性加重期主要病机为痰热壅肺、肺失宣 3讨论 降。通塞颗粒由葶苈子、地龙、赤芍、制大黄等组成，具有清热 基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase，MMPs)是一涤痰活血、宣肺降气平喘之功效。应用通塞颗粒治疗COPD急 组由Zn”、Ca”依赖性内肽酶所组成的酶家族，在结构上