临床酵母样真菌的系统鉴定及耐药性研究.pdfVIP

I临床研究 1 学装备2015年3月第l2卷第3期 临床酵母样真 的系统鉴定及I耐约Ⅲ究 曼等 1 资料与方法 18～24h，通过菌落观察和涂片进行初步鉴定。挑取 1．1一般资料 培养基上单个酵母样菌落 ，采用VITEK 2全 自动微 收集潍坊医学院附属医院干2013年 1 l2月住 生物鉴定仪和酵母菌鉴定卡YBC对真菌种类作出鉴 院的患有慢性 阻塞性肺疾病 chronic obstructive 定。 pulmonarydisease，COPD 、支气管扩张及肺癌等肺 2 药敏。利用酵母样真菌药敏试剂盒 微量稀释 部基础病以及尿路感染 、真菌性阴道炎及骨髓炎等患 法 ATB Fungus3酵母样真菌药敏板条对210株菌株 者标本和门诊送检的各类标本。入选患者1680例，其 进行药敏试验，药敏结果可通过肉眼判读 ，或者应用 中男性875例 ，女性805例 ；年龄l～90岁，从中分离 ATB仪器判读获取MIC，按照美国临床实验室标准化 出酵母样真菌210菌株，剔除相同部位的重复菌株。 委员会 NCCLS 标准,~ATB Fungus3产品说明书的 1．2设备与材料 建议将菌株分为敏感、中介或耐药。 1 仪器与试剂。采用法国生物梅里埃公司生产 3 数据处理与分析。药敏试验结果应用WHONET 的VITEK 2Compact全 自动微生物鉴定仪、Bact／ 5．6专业软件进行数据处理和分析。 AIERT 3D 120全 自动血培养仪；使用哥伦比亚血琼脂 2 结果 平板、沙保弱培养基、VITEK 2酵母菌鉴定卡YBC； 2．1临床标本来源及分布 酵母样真菌药敏试剂盒 微量稀释法 ATB Fungus359 酵母样真菌感染患者的年龄分布在1～90岁，其 法国梅里埃Biomerieux公司产品；卡泊芬净、米卡芬净 中男性60例 占57．1％ ，女性45例 占42．9％ ；60岁以 等微量肉汤稀释法药敏试验检测板条由山东鑫科生物科 上的老年患者6l例 占58．1％ 。所分离出的210株酵母 技股份有限公司提供。 样真菌分布在临床各类标本中，其中主要来 自痰液 占 2 培养基。使用改良SHADOMY琼脂，适用于 27．62％ 、尿液 占l6．19％ 、咽拭子 占l2．36％ 、分 所有的抗真菌药，主要成分包括酵母氮琼脂基础，葡 泌物 占12．36％ 和脓液 占l0．48％ 等标本，分离鉴定 萄糖和天冬氯酸，通过磷酸缓冲液控制二重感染，pH 的210株酵母样真菌以白假丝酵母菌为主，共140株 占 值为7．0。同时添加氯霉素控制细菌的污染。 66．67％ ；其次是热带假丝酵母菌30株 占14．29％ ； 3 标准菌株质量控制。本研究所用白色念珠菌 近平滑假丝酵母菌l8株 占8．57％ ，见表l。 ATCC90028、近平滑念珠菌ATCC22019和克柔念珠 2．2药物敏感试验结果 菌ATCC6258均由卫生部临床检验中心提供。 对210株酵母样真菌进行氟康唑、两性霉素B、伏 1．3 方 法 立康唑、卡泊芬净、54．氟胞嘧啶、伊曲康唑及米卡芬 1 分离培养与鉴定 。血液、腹水等无菌体液标 净共7种药物的敏感性实验进行统计分析，发现所有 本操作接种于培养瓶内，经Bact／ALERT 3D 120全 真菌对两性霉素B 100％ 、米卡芬净 99．0％ 、卡泊芬 自动血培养进行培养 ，阳性报警后涂片观察并转接种 净 98．1％ 、5一氟胞嘧啶 97．1％ 敏感性最强，其次为 勾 于沙保弱培养基上。痰液、尿液及分泌物等直接接种 伏立康唑 93．3％ 、氟康唑 90．5％ ，对伊曲康唑耐药 于沙保罗培养基、血平板上 ，放人35℃孵育箱培养 性最强，耐药率为32．4％，见表2。 表121O株酵母样真菌分类及在不同标本中的分布 株 病原菌 痰液 尿液 咽拭子 分泌物 脓液 阴道分泌物 血液 腹水 白假丝酵母菌 36 l6 14 22 20 12 9 10 热带假丝酵母菌 10 8 4 2 1 3 1 1 近平滑假丝酵母菌 4 4 7 2 0 0 1 0 光滑假丝酵母菌 2 4 0 0 0 3 l 1 罗伦隐球菌 3 l l 0 0 0 0 0 葡萄牙假丝酵母菌 2 0 0 0 0 0 0 0 都柏林假丝酵母菌 l 0 0 0 0 0 0 0 圆球形假丝酵母菌 0 1 0 0 0 0 0 0 阿萨希毛孢子菌 0 0 0 0 l 0 0 0 合计 58