替米考星与泰乐菌素对细胞因子的免疫调节作用.pdfVIP

生国直丝置匡芏盒勤塑苎凸芏垃金2螋§兰垄至量迨塞塞 替米考星和泰乐菌素对细胞因子的免疫调节作用 曹兴元，沈建忠，史为民 (中国农业大学动物医学院，北京100094) 【摘要】 替米考星是最新开发的兽用大环内酯类抗生素，为泰乐菌素的衍生物。有关研究显示替米考星可能通过非抗菌活 7巨噬细胞一单核细胞(RAW)和外周血 性的免疫调节作用发挥疗效。文通过构建的细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠RAW264 m-lp、IL．6，促进IL-10的分泌，而5ug／mL的替米考星和泰乐菌素均无调节作用。替米考星和泰乐菌素可能通过调节细胞 因子的合成而发挥免疫调节作用。 【关键词】替米考星；泰乐菌素；细胞因子；巨噬细胞；单核细胞；免疫调节 众所周知，在炎症的急性相反应中，巨噬细胞和单核细胞起着重要调控作用．两种细胞被激活后合成丈量 细胞或单核细胞相关的细胞因子，作为对病原微生物和毒物刺激后免疫反应的基础【ll。这些细胞因子合成水平 的变化常常用来评价免疫调节作用。 替米考星是最新半合成的大环内酯类抗生素，为泰乐菌素的衍生物。目前广泛应用于治疗牛陆”，羊嗍和猪嘲 的呼吸道疾病以及反刍动物的乳房炎嘲。替米考星的临床疗效归功于其较好的药代动力学特征口‘81和对相关病原 较低的MIC值B”。目前有资料显示替米考星可能通过非抗菌活性的免疫调节机制来发挥抗炎作用，例如促进中 性粒细胞的凋亡Ⅲ-1”。对人用的大环内酯类抗生素的研究也发现，红霉素可抑制人外周血荤核细胞合成TNF—a、 尚 IL．10是否具有免疫调节作用。 IL．10的合成而发挥抗炎作用。 1材料与方法 1_1细胞 有限公司。小鼠外周血单核细胞分离参照Khan等111方法进行。 1．2药品和试剂替米考星碱标准品购自罗氏公司：泰乐菌素碱标准品购自中国兽医药品监察所；相关细胞因 购自美国sigma公司；小鼠外周血单核细胞分离液购自美国Pharmacol公司。 l_3细胞培养细胞在含lo％胎牛血清的高糖DMEM培养基中培养，传代后接种于24j：L培养板中。共分为三 组：空白组(无药物和LPS处理)、LPS处理阳性对照组(LPSlug／mL处．1里18h)、替米考星或泰乐菌素(分别足5、 基金项目：国家杰出青年基金项目 edu．∞ 作者简介：曹兴元t1975年一)，男，河北荣皂岛人，博士研究生。E—mail,sjz@eau ——1 10和20 ug／mL)+LPS共处理组，LPS和替米考星或泰乐菌素同时处理18h。每组各作3个平行。 1．4替米考星和泰乐菌素的毒理学评价 100 ilm处测定各孔光吸收值(OD值)，计算出细胞相对活率。 然后加入DMSOuL溶解，用酶联免疫检测仪于595 l 5细胞因子的测定 取培养的细胞上清液100uL，按照细胞因子ELISA检测试剂盒说明书的程序操作。 TNF-a和IL-6的检测限是3 pe4mL，IL-IIj和IL-10的检测限为7pe}mL。 T 1．6数据处理及统计对实验结果进行方差分析，结果用平均值±标准误表示。数据差异显著性采用Student’s 检验进行分析。尸卯．05和P_0．01分别认为差异显著和极其显著。 2结果 2．1替米考星和泰乐菌素的毒理学评价 细胞一巨噬细胞20h后，与空白对照组和ILPS处理阳性对照组相比，细胞活率没有显著差异(见图1)，说明替米 考星和泰乐菌素对RAW细胞不具有细胞毒性作用。 2 O