一株放线菌发酵提取物抑菌活性初步的研究.pdfVIP

第七届全国新农药创制学术交流会论文集 一株放线茵发酵提取物抑菌活性初步研究· 杨佩文L2李铭刚2董丽英。李一青2刘树芳1赵江源2尚慧1崔晓龙2文孟良2李家瑞1‘。 (’云南省农业科学院农业环境资源研究所，昆明650205；1云南大学生物资源保护与利用重点实验室，昆 明650091) 摘要：从云南山区土样中筛选到一株放线菌ECO00002，对其发酵提取物的抑茵活性进行了测定．抑 菌活性测定结果表明，在离体条件下发酵提取物对稻瘟病菌(Pyricularia nicotinae)孢子萌发及茵丝生长均有较强的抑 星病菌(Alternariaalternata)和烟草黑胫病菌(Phtophthro 制作用．以烟草赤星病为靶标进行温室盆栽防治试验，防治效果为91．29％．对其发酵提取物活性成分进行 了粗分离，其抑菌活性成分主要为水溶性化合物． 关键词：放线菌；发酵提取物；抑菌活性 ， 目前，在农业有害生物防治中生物防治是最具有发展潜力的防治方法之一，而获得高效拮抗菌是生物 防治的基础¨一1。放线菌资源在天然资源中占相当大的比例，其活性产物是微生物农药的重要来源．放线 菌次级代谢产物因其结构复杂多样、活性独特已经成为寻找先导化合物的重要来源，同时由于放线菌具有 繁殖快、易培养等优点，可结合现代发酵工程技术，进行规模化培养，易于大量获得．因此，从放线菌次 级代谢产物中寻找新的活性化合物已成为天然产物研究的热点之一口^蕾1．为发掘和利用云南丰富的放线菌 资源，以稻瘟病菌、稻恶苗病菌、百合炭疽病菌、百合灰霉病菌、烟草赤星病菌和烟草黑胫病菌等为指示 菌．开展了放线菌发酵液提取物抑茵活性筛选，筛选到一批具有从中开发新型、高效、低毒微生物农药潜 力的菌株．其中，菌株ECO0002发酵提取物具有极强的抑菌活性，本试验研究了其对一些主要植物病原真 菌的抑菌活性，并对其主要活性成分进行了初步研究，试验结果报道如下． ，1材料和方法 1．1放线菌发酵培养液的制备 蒸去乙醇，水相采用冻于仪冻成干粉后置于提取物保存库。活性测定时，用等体积的水溶解． 1．2对6个供试病原真菌农抗活性测定 供试植物病原真菌水稻恶苗病菌、百合炭疽病菌、百合灰霉病菌、烟草赤星病菌在PSA培养基上培养， 稻瘟病菌和烟草黑胫病菌在燕麦培养基上培养． 采用孢子萌发抑制法和菌丝生长抑制法测定放线菌发酵提取物对供试植物病原真菌的抑制活性，以烟 。通讯作者l李家瑞．研究员，主要从事植物病理学研究·ppiyaas@public．km．yn．cn ． 第一作者：杨佩文(1973--)，男．云南丽江人．助研，硕士。主要从事植物病理学研究． 415 第七届全国新农药创制学术交流会论文集 草赤星病为靶标进行温室盆栽防治效果测定p’． 1．3发酵液活性组分的粗分离及活性测定 3次，乙酸乙酯萃取液蒸干，称重，取119用甲醇溶解，水定溶至500mL。编号为FE，萃余液蒸去乙酸乙 倍体积提取3次。乙酸乙酯萃取液，蒸干，取1／9用甲醇溶解，水定容至500mL，编号为肥，萃余液蒸去 乙酸乙酯，取I／9水定容至500ml，编号为躲．以烟草赤星病菌为靶标，对5个处理液进行孢子萌发抑制 作用、菌丝生长抑制作用及盆栽防治效果测定． 2结果与分析 2．1抑菌活性测定结果 测定结果如表I所示，菌株发酵提取物对供试5个植物病原真菌孢子萌发率均为100％．对5个供试 植物病原真菌均产生抑菌圈，抑菌圈直径在lOmm以上；其对烟草黑胫病菌菌丝生长抑制率为82．53％， 对烟草赤星病的温室盆栽保护作用为91．29％，具有较好的防治效果． 2，2发酵液粗分离成分抑菌活性测定结果 如表2所示，菌株发酵提取物粗分离成分中，MR和FR对供试烟草赤星病孢子萌发率均为100％， 对菌丝生长有强的抑制作用，温室盆栽防治效果分别为93．42％和90．76％．对烟草赤星病菌的孢子萌发和 菌丝生长抑制作用及温室盆栽防治效果，MR、FR的活性明显强于ME、FE，表明菌株