脂质质谱分析用于卵巢癌疾病的研究.pdfVIP

V01．33 2014年lO月 分析试验室 Suppl． of 6l一63 ChineseJoumal 第33卷增刊 AnaJysisI五bo哪唧 脂质质谱分析用于卵巢癌疾病研究 张阳阳1，白旭2，谭晓杰2，熊少祥1，赵镇文“ (1．中国科学院化学研究所活体分析化学实验室，北京质谱中心，北京100190； 2．中国沃特世(上海)有限公司，上海201206) 相色谱柱为CSH ID× 卵巢癌在妇科肿瘤疾病中死亡率居首位…。 C。。柱(1．7斗m，2．1衄n 研究表明，脂质小分子代谢异常与肿瘤发生发展密 100 切相关。就卵巢癌而言，脂质小分子溶血磷脂酸 丙矽乙腈／甲酸(90：10：0．1，∥∥y)，含有 10舢oL／L甲酸铵；流动相B为乙腈／彬甲酸(70： (1ysophosphatidicacid，LPA)在卵巢癌病人甚至早 期阶段的血液中被发现含量升高口“J，有作为卵巢 30：O．1，∥∥v)，含有10mmo】／L甲酸铵。线性梯 癌疾病诊断分子生物标志物的潜力，同时体外实验 度洗脱条件如下：1)0Ⅱlin，70％B；2)2min， 表明，LPA可以刺激卵巢癌细胞增殖、转移及入侵， 57％B；3)2．1min，50％B；4)12mill，46％B； 从而参与了卵巢癌的发生发展bJ。在卵巢癌肿瘤 5)12．1min，30％B；6)18miJl，1％B；7) 18．1 组织中，肿瘤部分脂质小分子硫苷脂(s曲ide， min，70％B；8)20min，70％B。流速设为 ST)也被鉴定含量明显高于旁系正常组织∞o。由400斗L／Inin。 此，系统研究正常人、卵巢良性肿瘤患者以及恶性 1．2萃取方法 肿瘤患者中脂质的变化，有助于理解脂质在卵巢癌 甲醇沉淀法用于萃取血浆中的脂质07|：20汕 疾病发生发展过程中的作用机理。在本工作中，我 血浆加入到180止甲醇剧烈震荡1血n，静置 5 r／ 们发展了基于质谱的血浆中脂质分析检测方法，进 min，再震荡lmiIl，离心5min(5℃，9184 而系统研究卵巢癌的脂质代谢，并结合临床信息与 min)后取上层清液进行质谱检测。 统计分析，探索与卵巢癌发生发展密切相关的脂质 1．3数据处理 小分子。 质谱数据采用MarkerLy腿软件进行主成分分 1 实验部分 析和偏最小二乘判别分析。 1．1仪器和试剂 2结果 UPLC G2 MS H-cl躺联合xevoQ·ToF 2．1脂质结构鉴定 (waters公司)用于脂质分析。正负离子扫描检测利用uPLc将萃取的脂质进行分离，得到如 模式结合DDA二级质谱检测模式被同时采用。液 图1所示的总离子流图。结合Q—TOF准确的一级 。4()00000 △