用荧光探针JC-1检测铜对鸡肝细胞线粒体膜电位的影响.pdfVIP

第 30卷第 5期 江 西 农 业 大 学 学 报 Vo1．30，No．5 2008年 10月 ActaAgricuhuraeUniversitatisJiangxiensis Oct．，2008 文章编号：1000—2286(2008)05—0865—05 用荧光探针JC一1检测铜对 鸡肝细胞线粒体膜电位的影响 曹华斌 ，李成梅 ，郭剑英 ，苏荣胜 ，李和平。，唐兆新h (1．华南农业大学 兽医学院，广东 广州 510642；2．江西农业大学 动物科学技术学院，江西 南昌 330045) 摘要：选用硫酸铜作为实验铜源，向肉鸡肝细胞悬液中加入不 同剂量的铜 (铜终浓度分别为 5lxmol／L、 10pm．ol／L、20Ixmol／L、30p．mol／L)，孵育15min后，利用新型荧光探针Jc一1标记 肉鸡肝细胞线粒体，在流式 细胞仪上检测Jc—l荧光强度的变化，观察铜对肉鸡肝细胞线粒体膜电位 (△卿”)变化的影响。结果显示：正 常肝细胞线粒体维持较高的膜电位，JC一1在线粒体内形成聚合物的红色荧光 占主导地位。用不同浓度的铜 处理肝细胞可导致线粒体膜电位下降，JC一1聚合物分解成单体，红色荧光强度减弱，并具有时间依赖性。此 结果表明，铜 (Ⅱ)能导致肉鸡肝细胞线粒体膜电位下降，暗示铜对体细胞的毒害作用可能是通过瓦解机体细 胞线粒体膜电位来实现的。 关键词：铜；线粒体；肝细胞；膜电位；荧光指示剂 中图分类号：Q952．7 文献标识码：A InfluenceofCopperonM itochondrialM embranePotentialin BroilerLiverCellbyFluorescentDyesJC——1 CAOHua—bin ，LICheng—mel～，GUOJian—ying， SU Rong—sheng ，LIHe—ping ，TANG Zhao—xin (1．CollegeofVeterinaryMedicine，SouthChinaAgriculturalUniversity，Guangzhou510642，China；2． CollegeofAnimalScienceandTechnology，JinagxiAgriculturalUniversity，Nanchang330045，China) Abstract：Coppersulfateasthesourceofcopper(II)，afterincubatingthebroilerlivercellwihtCun of 0~rnol／L，5I~mol／L，10p,mol／L，20p~nol／L，30ixmol／Lrespectivelyfor15minrespectively，JC一1，a new fluorescentprobe．incombinationwiht flow cyometrywasusedtodetecttheeffectofCu onbroilerliver cellmitoehondrialmembranepotential(△ )，Theresultsshowedthat：TheeffectofCu“onbroilerliver cellmitoehondrial membranepotentialhaddose—dependence．thenormalliverceilsmaintainedhighmito— chondrialmembranepotential。redfluorescentdominatedinhtemitochondriaproducedbyJC一1，livereeUs treatedwithdifierentconcentrationsofCun wouldresultindecreaseofmitochondrialmembranepotentia1．JC 一 1aggregatedec6mposedintomonomer．intensityofredfluorescentweakened．TheresultshowedhtatCu“ Cna lcadtohtedeclineofbroilerl