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一 76一 江苏农业科学 2010年第6期 钱春艳，曹有龙，段安安，等．枸杞花药培养若干影响园子的研究[J]．江苏农业科学，2010(6)：76—78 枸杞花药培养若干影响因子的研究 钱春艳 ，曹有龙 ，段安安 ，周 军 (1．宁夏农林科学院枸杞工程技术研究中心，宁夏银川 750002；2．西南林学院资源学院，云南昆明650224) 摘要：以宁杞 1号、大麻叶、0207、蒙杞 1号4种枸杞花药为试材，采用正交试验，对影响枸杞花药愈伤组织诱导 率、胚状体发生率的因素进行了研究。结果表明：枸杞花药培养对基因型有很大的依赖性 ，宁杞 1号是较容易培养的 基因型；植物生长调节剂和基本培养基对枸杞花药培养的影响很大，1．0mg／L6一BA与0．1me／LNAA组合有利于胚 状体的产生，1．0mg／L6一BA与0．5mg／L2，4一D组合适合于愈伤组织的诱导，MS培养基比B，培养基更适合枸杞花 药培养 ；花药经过0．3％甘露醇预处理能提高愈伤组织诱导率 ；培养基中添加 1．0g／L活性炭、花药32℃热激处理 24h有利于枸杞胚状体的发生。 关键词 ：枸杞；花药培养；愈伤组织 ；胚状体发生 中图分类号 ：$663．904 ．3 文献标志码 ：A 文章编号：1002—1302(2010)06—0076—02 枸杞(LyciumL．)作为 “药食同源”植物，具有重要的经济 圃种植保存的宁杞 1号、大麻叶、0207、蒙杞 1号枸杞。 价值。早在2O世纪80年代，许多学者就已开展了枸杞花药 1．2 方法 培养的研究u ；但由于存在诱导率低、基 因型之间的差异、 1．2．1 枸杞花药培养 花‘蕾在O8：oo—09：00之问摘取，选 供体植株的生长状态等因素的影响，枸杞花药培养的植株再 取花粉发育处于单核中晚期的花蕾。将花蕾用70％乙醇浸 生过程还存在着诸多差异，限制了枸杞花药培养的发展，而小 308。然后用0．1％氯化汞溶液表面消毒 10min，用无菌水冲 麦、水稻和玉米花药培养研究已应用于育种实践。段丽君等 洗 3—4次 ，在超净工作台上剥开花蕾 ，取出花药，将其接种在 较系统地研究了激素、活性炭、蔗糖和低温预处理热激处理等 诱导培养基中，25℃暗培养。 因素对枸杞花药培养的单因子影响试验 J，对多因子的研究 1．2．2 试验设计 为了同时考察多因子、多水平对枸杞花药 目前尚未见报道。本试验以宁杞 1号、大麻叶、0207、蒙杞 1 培养的影响，采用正交试验 L (2×4)设计 ，将活性炭、甘 号为试材，对影响枸杞花药培养的基因型、基本培养基、植物 露醇、植物生长调节剂添加到MS和B，培养基中。正交表的 生长调节剂、活性炭、甘露醇、热激处理6个因素进行了多因 表头设计以及各因子水平设计如表 1所示。 子试验研究，旨在探索枸杞花药培养的最佳条件，提高枸杞花 1．2．3 数据统计 花药接种2周后，每周统计 1次愈伤组织 药培养诱导率，为新的种质资源培养提供研究基础。 发生数、胚状体发生数。愈伤组织诱导率 =(产生愈伤组织 的花药数／接种花药数)×100％；胚状体诱导率=(产生胚状 1 材料与方法 体的花药数／接种花药数)×100％。 1．1 材料 1．2．4 数据分析 利用 DPS8．01进行方差分析，对影响因 试材为宁夏农林科学院枸杞工程技术研究中心种质资源 素进行LSD显著性分析，比较同一因子对不同试材的影响。 表 1 枸杞花药培养影响因子的L32(2x4)正交设计 剂对愈伤组织诱导起主导作用；基本培养基、甘露醇对枸杞花 2 结果与分析 药培养愈伤组织生成率的影响达到极显著或显著水平。