小白菊内酯改善胰岛素抵抗的分子学机制.pdfVIP

· 294 · HeraldofMedicineVo1．34No．3March2015 小 白菊 内酯改善胰岛素抵抗的分子学机制 ；l： 常化静 ，何羡霞 ，海洋 ，吴新荣 (1．南方医科大学研究生院，广州 510515；2．广州军区广州总医院药学部，广州 510010) 摘 要 目的 探讨小白菊内酯(PTL)对胰岛素抵抗 (IR)的作用及其分子学机制。方法 用不同浓度的胰岛素 对HepG2细胞进行不同时间的诱导，通过葡萄糖氧化酶法测定HepG2细胞葡萄糖含量，明确建立稳定的HepG2胰岛素 抵抗模型的胰岛素诱导浓度及诱导时间。模型建立后，应用不同浓度 L分别作用于 IR细胞24h，通过CCK8法评价 细胞活性，葡萄糖氧化酶法测定 IR模型HepG2细胞葡萄糖消耗量，明确PTL最佳作用浓度，Q—PCR法检测细胞核因子 KB(NF—KB)及 [KB~xmRNA表达情况，免疫蛋白印迹技术检测蛋白IKB0l表达情况。结果 HepG2细胞产生IR的最佳作 用时间是24h，最佳胰岛素浓度为 10p．g·mL～。PrI1L的最佳作用浓度为20 mol·L一，应用其干预 IR的HepG2细胞 后 ，与 IR的HepG2细胞相比，NF—KB活性明显降低 (P0．05)，IKBa降解被抑制 (P0．05)。结论 L可明显抑制 IKBa降解，减少NF—KB解离，改善高胰岛素诱导产生的IR。 关键词 小白菊内酯；胰岛素抵抗；HepG2细胞；核因子KB；核因子KB抑制蛋白 中图分类号 R286；R965 文献标识码 A 文章编号 1004—0781(2015)03—0294—04 M olecularM echanism ofParthenolideImprovingInsulinResistanceInducedbv Insulin CHANGHuajing ，HEXianxia，HAIYang，WuXinrong(1．GraduateSchoolofSouthernMedicalUniversi～ ty，Guangzhou510515，China；2．DepartmentofPharmacy，GeneralHospitalofGuangzhouMilitaryCommandof PLA ．Guangzhou510010，C ina) ABSTRACT 0bjeetive ToinvestigatethereversaleffectandmolecularmechanismsofNF．KBinhibitorparthenolide (erE)oninsulinresistance(IR)． Methods HepG2cellsweretreatedwithinsulinatdifferentconeentrationsan(itime points，theglucoseconsumptionofHepG2 cellswasmeasuredviaglucoseoxidasemethodtodeterminethebestconcentrations andtimeforestablishinginsulin—inducedinsulinresistanceonHepG2cells．Aftermodeling．differentconcentrationsofPTIwere addedincellsofr24hofrdeterminingeellactivityandglucose—consumption．Q—PCRwasusedtodetecttheexpressionofNF—KB andIKBc~mRNA incells，andwesternblotwasusedtodetecttheexpressionofproteinIKBc~． Results Thebestreactiontime andconcentrationofrinsulininducingresistanceofHepG2cellswere24handat10Ixg ·mL ．Theoptimum actingcloseof L was20Ixmol·L