环氧化酶-2基因对食管鳞癌细胞株增殖与凋亡的影响.pdfVIP

制剂PDTC所阻断。 2．阿司匹林通过抑制转录调节因子瘟kB的激活的途径抑制了相关癌基因蛋白的表达从而抑 制癌细胞的增殖。 环氧化酶一2基因对食管鳞癌细胞株增殖和凋亡的影响 张莉 张澍田 于中麟许彩民 首都医科大学附属北京友谊医院消化科 首都医科大学消化病学系 北京市消化疾病中心 背景和目的我国是食管癌的高发国家，也是目前世界上食管癌死亡率最高的国家之一，因此 对食管鳞癌的发病机制及干预阻断研究具有非常重要的意义。环氧化酶．2在食管鳞癌组织中表达增 加，而环氧化酶抑制剂可以减少食管癌的发病，但其具体作用机制目前仍不清楚。 抑制肿瘤的机制。 blot方法分析RNA干扰的效果， 的表达，通过荧光显微镜观察RNA干扰的转染效率，用Western 用噻唑兰法定量检测RNA干扰和阿司匹林对食管鳞癌细胞增殖的影响，用流式细胞仪检测RNA干 扰和阿司匹林对食管鳞癌细胞凋亡的影响：我们将经过测序的人全长环氧化酶．2(hCOX．2)基因， Westernblot方法证实转染后COX．2的表达，用噻唑兰法定量检测基因转染和阿司匹林对食管鳞癌 细胞增殖的影响，用流式细胞仪检测基因转染和阿司匹林对食管鳞癌细胞凋亡的影响；将瞬时转染 的细胞经过G418筛选后，建立COX-2稳定表达的细胞株，并完成裸鼠的致瘤性实验，通过免疫组 化的方法研究阿司匹林对裸鼠移植瘤细胞COX一2表达和增殖的影响。 表达在食管鳞癌细胞中，24--一48h含绿色荧光的细胞数最多，72h含绿色荧光的细胞数逐渐减少，因 过Western COX．2表达下降约为对照组的60％。 采用Westernblot方法证实转染后COX-2的表达。结果显示，与母本细胞组和空载体对照组相比， 用后，细胞COX-2蛋白的表达比母本细胞组和空载体组降低。 ·154· 长抑制作用增强，CoX．2基因干扰和阿司匹林联合作用后，肿瘤细胞的生长抑制作用比单纯RNA 用减弱，与母本细胞组和空载体对照组相比，没有统计学上的显著差异。 结果显示，母本细胞组和RNA干扰的阴性对照组的凋亡率比较低，COX．2基因干扰后，促凋亡作 用增加；COX．2基因干扰后再给予阿司匹林，促凋亡作用进一步增加。 裸鼠体内成瘤实验结果显示，裸鼠背部皮下等体积接种PBS的阴性对照组未见肿瘤生长，COX．2 空载体组。大剂量阿司匹林能有效抑制人食管鳞癌裸鼠移植瘤的生长，肿瘤体积和重量均明显低于 对照组，抑瘤率为5l。80％(ECl09)和54131％(EC9706)。 各组裸鼠移植瘤免疫组织化学染色显示，COX-2蛋白主要表达在肿瘤细胞的胞浆和及沿核膜呈 线状分布，ki67蛋白主要表达在肿瘤细胞的胞核。将各组裸鼠COX．2免疫组化染色的光镜标本放入 计算机图像分析仪中进行扫描。结果显示，COX-2基因转染组细胞的COX-2蛋自表达与母本细胞对 照组和空载体组相比，没有统计学上意义：大剂量阿司匹林治疗组和小剂量阿司匹林治疗组COX．2 蛋白的表达与对照组相比，没有统计学上的意义。 将各组裸鼠ki67免疫组化染色的光镜标本放入计算机图像分析仪中进行扫描。结果显示，COX-2 基因转染组的细胞增殖能力略强于母本细胞对照组和空载体组，大剂量阿司匹林治疗组和小剂量阿 司匹林治疗组的肿瘤细胞增殖能力与转COX．2基因对照组相比，无明显统计学上的差异。 结论 增殖受到抑制，致凋亡作用增强。阿司匹林和RNA干扰对肿瘤细胞的增殖和凋亡可产生协同效果。 用减弱。阿司匹林可降低转染后的这种促生长和抑制凋亡作用。 3．大帮量阿司匹林能有效抑制人食管鳞癌裸鼠移植瘤的生长，提高抑瘤率。 1982--一2005年中国北京地区单一医疗机构返流性食管炎， Barrett食管流行病学分析 樊宇靖刘宾钱冬梅李莉 首都医科大学附属北京同仁医院消化科北京市(100730) 王立东 郑州大学医学院医学实验中心癌症研究室 河南省食管癌重点开放试验室河南郑州市(450052) 目的研究我国北京地区返流性食管炎，Barrett食管的流行病学变化特征。 方法 回顾性分析1982--2005年间在北京首都医科大学附属北京同仁医院就诊并接受胃镜检