经皮微透析的建立和吴茱萸提取物的经皮吸收药动学特性研究.pdfVIP

经皮微透析的建立及吴茱萸提取物的经皮吸收药动学特性研究 涂星1，唐洪梅2，何嘉仑2， 李得堂2，房财富1 陈豆1 1.广州中医药大学，广东广州 510006 2.广州中医药大学第一附属医院，广东广州510405 目的：建立裸鼠在体皮肤微透析技术，并以此技术研究吴茱萸提取物经皮吸收的特性。方法：以裸鼠为研究对象， 建立裸鼠经皮微透析采样技术，以吴茱萸碱和吴茱萸次碱为指标成分，利用所建立的微透析采样技术取样，并结合高效液相 色谱分析，测定吴茱萸提取物经皮给药后透析液中的药物浓度，通过相对损失率的校正，计算皮肤药物浓度，并利用kinetica 5.0软件对皮肤药物浓度和时间进行非房室模型拟合，计算相关统计矩参数。结果：吴茱萸提取物中吴茱萸碱的达峰时间为 (150±15.3)min，半衰期(t1/2)约(263.7±41.6)min;吴茱萸次碱的达峰时间为(90±2.1)min，半衰期(t1/2)约 (194±17.3)min；二者均能较快的达到峰值，并在较长的时间内保持稳定释放，使皮下组织中的药物浓度保持在一个相 对恒定的水平。结论：本研究中所建立的微透析方法可用于吴茱萸提取物的皮肤药动学研究，吴茱萸碱和吴茱萸次碱可透过 皮肤吸收而发挥临床药效。 经皮微透析；吴茱萸碱；吴茱萸次碱;经皮吸收；高效液相色谱法 中华中医药学会2013年药房管理分套学术年会论文汇稿 为5mm。灌流液为人工细胞外液——-Krebs—Ringer回收溶剂。用K-R液定容至lOmL，即得。 122mmol／L、KCl 112mmol 溶液(NaCl 3mmol／L、MgS04 2．1．2对照品溶液的制备：精密称取吴茱萸碱 ／L、KH：PO。0．4mmol／L、NaHC0325mmol／L、CaCl2约0．6mg、吴茱萸次碱约0．2mg，加K-R液定容至每 p 1．t 1．2mmol／L)，临用前配制。 lmL含吴茱萸碱60g、吴茱萸次碱20g的混合 溶液，即得。 1．3分析系统 2．1．3阴性对照溶液：取K-R液，过0．22“m 6410 Quad AgilentTripleE／MS系统(美国微孔滤膜，即得。 Agilent公司)包括G1311A阴±元泵，G1322A脱2．2 HPLC测定方法的建立 气泵，G1329A自动进样器，G1216A柱温箱，2．2．1色谱条件及专属性考察 MassHunter软件控制及数据处理系统。 色谱柱：DiamonsilC18色谱柱 p 1．4实验动物 (250mm×4．6mm。5m)，柱温：25℃，流动相：乙 SPF级裸鼠，5-7周龄，雄性，体重：80±109，腈：水：四氢呋喃：冰醋酸(41：59：1：0．2)；检测波 uL。ODSC18 山广州中医药大学实验动物中心提供，许可证号： 长为225nm：流速：lmL／min；进样量10 SCXK(粤)2008—0020。 保护柱连接于分析柱前。在选定的色谱条件下，吴 2 实验方法 茱萸碱峰的保留时间约为12．69min，吴茱萸次碱峰 2．1试液配制 的保留时间约为14．73min(见图1)。理论塔板数 2．1．1供试品溶液的制备：精密称取吴茱萸粉 按吴茱萸次碱计不小于3000，最低检测限吴茱萸碱 末(过三号筛)约19，精密称定，置圆底烧瓶中， 为0．5p g／mL，吴茱萸次碱为0．20ug／mL。 精密加入80％乙醇5