稀释粉对猪精液常温保存效果的研究.pdfVIP

第 36卷 第 1期 家畜生态学报 Vol_36NO．1 2015年 1月 ActaEcologiaeAnimalisDomastici Jan．2015 稀释粉对猪精液常温保存效果的研究 苏泽智，李亚新，魏海燕，雷佳琦，刘 琦，朱林炜，慕 勇， 李丰隆，何 锦 ，杨公社 ，胡建宏 (西北农林科技大学 动物科技学院，陕西 杨凌 712100) [摘 要] 为 了开发猪精液常温保存新型稀释粉 ，通过检测精子活率、质膜完整性、顶体完整 性以及超氧化物歧化酶 (SOD)活性 、过氧化氢 (H O)和丙二醛 (MDA)产生量等指标，分析常 温保存稀释粉对猪精液的保存效果的影响 。结果表明，在常温保存条件 下，自配稀释粉保存猪 精液 5d时间 内，精子 活率平均 为 0．63，精子顶体完整率和质膜完整率分别达到 78．4 和 48．6 ；SOD活力、H2O2产生量和 MDA 产生量分别是 177．39IU／mL、86．28mmol／mL和 9．36nmol／mL，可以在生产实践 当中应用。 [关键词] 常温保存 ；猪精液；稀释粉 ；保存效果 [中图分类号] $811．6 [文献标识码] A [文章编号] 1005—5228(2015)O1—0059—04 随着猪人工授精技术的广泛应用 ，精液的保存 丙二醛 (MDA)产生量等，以便对在生产中的应用提 技术也应运而生。精液的稀释保存是猪人工授精成 供一定的理论基础。 败的关键 ，其保存方法包括常温保存 、低温保存和冷 1 材料与方法 冻保存三种 。由于猪低温保存与冷冻保存技术还不 成熟 ，因而人工授精 中以常温保存 的为主 ，占到使用 1．1 试验材料 总量的99 J。 1．1．1 精液来源 试验精液来 自于杨凌区养猪服 猪精液常温保存稀释粉是用于配制适宜猪精子 务站 2O月龄健康成年的长 白种公猪。用手握法采 存活、保持其受精能力的稀释液 ，为精子提供代谢所 精 ，收集 中段浓缩部分 ，经过滤后保存于保温杯 中， 需的能量物质 、适当的PH和渗透压环境 ，以保证精 40min内带 回实验室。在 37．5℃下镜检 ，并用分 子在体外具有较长的存活时间及结构功能的完整 。 光光度计在 550nm 处进行 比色，计算精子密度 。 猪精液常温保存 的国家标准 (GB23238—2009)要求 选择色泽和气味正常 ，精子活率在 0．8以上，精子数 精液在稀释保存 3天后的精子活力不低于 0．6_2]。 密度为 3×1O。～5X10 ／mL的精液用于试验研究 ， 目前国内外猪精液常温保存 的稀释粉配方种类很 并将部分原精留作空白组 ，检测精子活率、顶体完整 多，但 由于质量控制不合格和配方的差异 ，一些稀释 性和质膜完整性 ，以及 SOD活性、H。O 和MDA 的 粉存在应用效果不稳定、有效保存时间达不到 国标 产生量 。 要求、且成本较高等缺点，严重制约了猪人工授精技 1．1．2 试剂药品 葡萄糖 、海藻糖 、乙二胺 四乙酸 术 的发展 [3]。因此 ，为了探究一种保存效果可靠、成 二钾 (EDTA2K)、三羟 甲基氨基 甲烷 (Tris)、柠檬 本低廉的稀释粉 ，本试验设计出一种新 的稀释粉配 酸、柠檬酸钠 、碳酸氢钠 、庆大霉素、N一乙酰半胱氨 方 ，并用该配方对猪精液进行常温保存 ，分析精子活 酸、牛血清 白蛋 白(BSA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、 率、有效存活时间、顶体完整率 、质膜完整率及超氧 过氧