玉米免DNA制备单株SSR和SCAR基因分型方法研究.pdfVIP

维普资讯 安徽农业大学学报，2007，34(3)：324—327 JournalofAnhuiAgriculturalUniversity 玉米免 DNA制备单株 SSR和 SCAR基因分型方法研究 张 玮 ，谢传晓 ，朱苏文 ，刘晓鑫 ．路 明 ，张世煌 ，程备久 (1．安徽农业大学生命科学学院，合肥 230036；2．中国农业科学院作物科学研究所，北京 100081) 摘 要：探讨采用免DNA制备法分析玉米单株 SSR与SCAR分子标记的基因型。分别刮取各单株少许叶肉 细胞到 lXPCR缓冲液中，置于PCR仪上 95℃10min，冷却，添加PCR其它组份，完成 SSR与SCAR的PCR扩增与 显色成像。免除模板DNA制备过程 ，对掖478与丹340两个亲本及 57个(共58个)F，分离群体单株分别实现SSR 标记一phi402893基因型快速鉴定，对掖 478与丹 340两个亲本及 5个 F，分离群体单株分别实现 SCAR标记一 MITE185基 因型快速鉴定。 关键词 ：SSR；SCAR；基 因分型；免 DNA制备 ：分子标记辅助选择 中图分类号：s513；Q78 文献标识码：A 文章编号：1672—352x(2007)034)324-04 A fastSSR andSCAR genotypingmethodwithoutDNA preparation inmaize ZHANG Wei，，XIE Chuan—xiao ，ZHU Su—wen ，LIU Xiao．xin ，LU Min ，ZHANG Shi．huang ， CHENGBei-jiu (1．SchoolofLifeScience，AnhuiAgriculturalUniversity，Hefei230036； 2．InstituteofCropScience，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beijing100081) Abstract：TheobjectiveofthisstudyistoexploitthepossibilityofSSRandSCARgenotypingofmaizeindivid- ual plantwithoutDNA preparation．Severalcellswerescratchedandputinto1XPCR buffer，boiledat95~C for10 mininPCR thermocyclerandthencooleddown．TheotherPCR reactioncomponentswereaddedandSSR ＆ SCAR PCR amplificationswere finished．SSR locus，phi402893，had been genotyped successfully amongYe478 and Dan340alongwith57individualsoftheirF2progeny(58intotals)asdescribedmethod．MITE185，oneofSCAR markersofDwarf8geneassociatedwithearlymaturity，hadbeengenotypedsuccessfullyamongYe478andDan340 alongwith5individualsoftheirF2progenyasdescribedmethod．TheresultssuggestthattherapidSSR andSCAR genotypingwithoutDNA preparationcouldbeusedintomolecularmarkerassistedselectingthetargetgenotypesa— mongindividuals． Keywords：SSR；SCAR；genotyping；wi