茶碱对小脑颗粒神经元凋亡的保护作用及其作用机理.pdfVIP

维普资讯 。 一 第 21卷 第 l期 右江民族医学院学报 V 淼 1999年 2月 Joum~ofYoujiangMedicalCollegeforNationalities 茶碱对小脑颗粒神经元凋亡的保护作用及其作用机理。 广州中山医科大学药理学教研室 。黎明遵颜光美(广州5lo089) yj／ 摘要 为探讨茶碱对神经元凋亡的影响及其作用机理．建立小脑颗粒神经元的低钾凋亡模型，用DNA凝腔电泳、FDA 染色和玻射免疫等方法，发现经不周浓度茶碱 (1～20mmollL)处理．低钾培养的小脑颗粒神经元存活率相应提高22％ ～ 100％，量效关系有高度显著性(P0．01)．EGⅡ=2．97reotol／L；经荼碱(20reotol／L)处理的细胞，其DNA凝腔电诛带 没有 “梯于 状分布；与 同浓度茶碱(5～80reotol／L)在0 培葬箱孵育 15rain，小脑颗粒神经元内cAMP均升高，且是 剂量依赖性的。认为茶碱对擞去极化浓度氯化钾诱发小脑颗粒神经元的凋亡有保护作用，此作用产生障与其升高小脑 关羹键调经小脑；神肇 主蔷 酸腺苷；氯化钾 于 习垮爱孝杰柙强 ．乖；茶碱；细胞凋亡；环磷酸腺苷；氯化钾 子，／^ 、干J 苛 二 T’ ， 一 ’ —一 ———一 f 。 细胞凋亡是其生命周期最终的生理过程。近期的研究发 天．按表 1分组实验。 现，这一过程对多细胞生物个体的发育、存活和保持各组织结 构与功能的正常有着积极而重要的意义。据估计在胚胎发育 表 1 分组与现察指标 或出生后的早期阶段．中枢神经系统有多达50％以上的神经元 分组 观察指标 发生援亡。越来越多的证据表明神经元凋亡不仅在 Porkinson 病和Aliheimex等神经退行性疾病的发病机理中起关键作用，而 l0 noVLFomkolin(FK) 且与脑缺血及脑损伤等中枢神经损害的病理过程有关 “】。小 20mmoltLTheophylline(Theo) 细胞 内DNA片段 脑颗粒神经元易在含击极化浓度氯化钾 (25reotol／L)的培养基 5mmot／LKCL(低钾) 中存活维持，且常可获高于95％纯度的细胞。降低氯化钾浓度 25mmol／LKCL(高钾) 致复极化水平 (5mrt~l／L)，这些神经元将发生凋亡。这是体外 5mu*d／lKCL(低钾) 研究神经元凋亡最常用的方法和模型之一(下简称为低钾凋亡 25mmol／IKCL(高钾) 模型)。近年来对茶碱的作用有新发现，如引起人粒细胞凋 10u．mol／LFor~kolin 亡 】．促进慢性淋巴细胞白血病细咆凋亡 】。但对神经元未见 1mmot／LThughylline 细咆形态、存活率 类似的报道。本研究用低钾凋亡模型探讨茶碱对神经元凋亡 5mⅡ LTheophylline 的影响及其机制。 10mmol／ITheophylbne 1 材料与方法 20mmol／LTheophylline 11 动物 出生