荧光原位杂交(FISH)技术在转基因小鼠检测中的应用.pdfVIP

维普资讯 第 2O卷第 4朗 上 海 交 通 人 学 报 (农 、 科 学 板 ) V ()1．20N 【，．．1 2002年 12川 J()URNAI()FSt1．＼G}IA!JIA(1T() (；UNIVERSIFY fAGRICUITUR ＼ISCIEN(；E) Dec．2002 文章编号 ：1000—193X(2002)04—0288．03 荧光原位杂交 (FISH)技术在转基 因 小 鼠检测 中的应用 谢建云，邵伟娟，潘漪清，高 诚 (上海市实验动物质量监督检验站，上海 200032) 摘 要：制备转基 因小鼠特有 的DIG标记探针 ，应用染色体荧光原住杂交 (FISH)技术，对转基 因小鼠外周血细胞 的遗传性 状进行分析 ，检测其舍子类型，以挑选纯合子小鼠用于保种。结果杂合型小鼠61％的细胞有一个荧光信号，而纯合型小鼠约 24 的细胞有两个荧光信号，48％的细胞有一个荧光信号，野生型小鼠无荧光信号。因此染色体荧光原住 杂交技术可作为 检测转基 因小 鼠遗传特性的一种方法。 关键词：荧光原住 杂交 (FISH)技术；转基因小鼠；遗传检测；合子类型 中图分类号：$865．1；Q78 文献标识码：A Application ofthe technique offluorescence insitu hybridization indetecting transgenicm ice XIE Jian—yun，SH AO W ei— 娌 ，P Ⅳ Yi—qing，GAO Cheng (ShanghaiQualityMonitoringCenterforI．aboratoryAnimals，Shanghai200032，China) Abstract：Peripheralbloodcellwasanalyzedbytechniqueoffluorescenceinsituhybridization(FISH)usingtheDIG—-label—、 ing transgenicm icepeculiarDNA probe，tOdistinguishthehomozygousmicefrom hem izygousand wildones．TheResult showedthat61％ofhemizygousmicepresentedonefluorescencesignal，24 ofhomozygousmicepresentedtwofluores— cencesignals，48％ ofhomozygousmicehadonesignal，whilenosignalwasfoundinwildone．Sothetechniqueoffluores— cenceinsituhybridization(FISH)isaeffectivemethodtOdetectthezygotictypeofthetransgenicmice． Keywords：fluorescenceinsituhybridization (FISH)；transgenicmice；transgenicdetection；zygotictype 转基因动物是指用实验方法将特定的外源基因导人动物早期胚胎细胞，使之整合到染色体上，外源基 因能随着动物细胞的分裂而增殖，在动物体 内得到表达 ，并能遗传给后代 ；或将动物的某段基因剔除或封 闭，在动物体 内不表达，并能遗传给后代的一类动物[】]。IFNTR 小 鼠为了干扰素受体缺损，此鼠存在免疫 缺陷，常用于干扰素作用的研究[2]。 转基因动物在繁育过程中的关键是如何使其遗传特性不丢失，在繁育过程 中，应该定期对其进行监 测，筛选出纯合子转基因动物进行保种、生产，以确保种群质量的稳定性。转基 因动物的筛选主要有 PCR 法、Southern杂交法、荧光原位杂交法和表型观察法等[3]，在此我们用荧光原位杂交法对 IFNTR％品系 转基因小 鼠进行检测。 1 材料和方法 收稿 日期 ；200