胃灵颗粒对胃癌前病变细胞调亡基因影响的实验的研究.pdf

以黄芪为君，益气健脾大补元气：太子参、沙参健脾养阴为臣：佐以莪术、丹参、芙蓉叶、生地榆 清热凉血化瘀；使以山楂消食和中。全方共凑益气健脾、养阴清热化瘀之功。盖气为血帅，气行则 血行，气虚则瘀阻络脉。本病病机以其气阴两虚，瘀热内阻，故重用黄芪、太子参，辅以莪术、芙 蓉叶等配合，令气充血行，瘀阻自消，切中病机的关键。 实验研究表明：黄芪可增强单核系统的吞噬功能，增加病原微生物诱生干扰素的能力，增强机 体的免疫力；莪术有抑制肿瘤细胞增生的作用。黄芪与莪术相配可逆转其器质性病变的病理变化， 从而促进胃粘膜细胞的生长和逆转；芙蓉叶、生地榆等清热药能增强微循环，有利于改善胃粘膜的 血液供应及营养，降低血管的通透性，减少炎症渗出，有利于局部炎症的消散吸收。诸药合用的最 大优点是既无胃肠道副作用，又能加速胃粘膜上皮细胞新生并可见胃粘膜固有腺体的再生，从而使 肠上皮化生消失，恢复其生理功能。治化汤无论在症状改善以及胃镜下病理改变都明显优于对照组。 胃灵颗粒对胃癌前病变细胞调亡基因影响的实验研究 谢晶日 李威 梁国英杨丰源 黑龙江中医药大学附属第一医院消化科(150040) 胃癌前病变(GPL)是一个病理概念，主要指胃黏膜中的重度异型增生和(或)不完全性肠上 皮化生，具有较高的癌变率。西医学除手术治疗外尚无较好的治疗方法，笔者以中药复方胃灵颗粒 对GPL的治疗进行了临床观察研究，结果表明该药具有较好的抑制GPL发生发展的作用，为揭示 该药的疗效作用机制，进一步观察了其对大鼠胃GPL组织中Bcl．2、Bax、P53蛋白表达的影响，现 将结果报告如下。 材料与方法 验动物中心提供。 2．药物与试剂 胃灵颗粒(冲剂)：黑龙江中医药大学药厂提供；维酶素片：北海阳光药业有 疫组化试剂盒，武汉博士得公司提供。 3．动物分组及处理大鼠随机分成正常组、模型组、中药治疗组、西药治疗组，根据成人日服 药量折算成大鼠灌胃剂量，中药治疗组予胃灵颗粒29／kg·d，西药治疗组予维酶素混悬液lg／kg·d，灌 胃12周。胃癌前病变模型参照文献中方法制作，即MNNG合并饥饱失常造模方法：将MNNG溶于 蒸馏水。配成lg／L的储备液(每周配置一次)，4C避光保存，每日使用前用自来水配制成100ug／ml 浓度的使用液，装入黑色饮水瓶中，供大鼠自由饮用。采用饥饱失常法，给大鼠2天饱食，l天饥 饿，3天循环1次，饥饿日禁食但常规给予MNNG使用液自由饮用。造模各组大鼠饲料中加入0．03％ 的雷尼替丁。并且以无水乙醇lml／只，隔周空腹灌胃1次，正常组隔周灌服等量生理盐水。共造模 26周。模型组于造模26周后处死，其它各组于实验38周后处死。 4．Bcl-2、Bax、P53免疫组化反应 4．1 切片制备大鼠用3％戊巴比妥0．3ml腹腔注射麻醉，开腹后取出全胃，沿胃大弯做纵行切 缓冲福尔马林固定液内，续之梯度乙醇脱水、二甲苯透明、浸蜡、包埋、石蜡切片、片厚10um， 一86— HE染色。 4．2 Bcl．2、Bax、P53免疫组化反应采用SABC法。 5．统计学方法 切片在光镜统一放大倍数下，胞浆、胞膜和胞核染色不计数，染色强度分为： 1．弱阳性：浅棕色；2．强阳性：深褐色。结合阳性产物着色深度和分布范围，分为4级：．：无任何 目的细胞阳性(目的细胞在胃癌中指胃癌细胞，在不典型增生中指不典型增生细胞，在正常胃枯膜 中指胃腺细胞)。+：每张切片仅有25％的细胞强阳性，或者大多数目的细胞弱阳性。++：2550％ 目的细胞强阳性。卅：50％目的细胞强阳性。所得数据用SPSS软件进行统计学处理。 结果 1．各组大鼠胃组织HE染色结果正常组大鼠胃粘膜偶见炎细胞浸润。模型组大鼠胃粘膜细胞 可见中度及轻度异增生，肠上皮化生，萎缩及大量炎细胞浸润，血管增生形成。中药治疗组和西药 治疗组大鼠胃粘膜细胞可见异型增生、肠化生、萎缩及炎细胞浸润，与模型组比较，上述改变明显 减轻。(见表1) 表1各组大鼠病理组织学情况比较 2．各组大鼠Bcl．2免疫组化染色结果(见表2) 表2各组大鼠Bcl．2免疫组化染色结果比较 中药治疗组：模型组P0．05：西药治疗组：模型组P0．05；中药治疗组：西药治疗组P0．05 3．各组大鼠Bax免疫组化染色结果(见表3) 表3各组大鼠Bax免疫组化染色结果比较 中药治疗组：模型组P0