L—肉碱的检测方法.pdfVIP

维普资讯 7一)厂／6‘ 《生物工程进展~1999，~o119tNo．5 L一肉碱的检测方法 墼彗孥 }j7。 (北京市营养潺研究所 100054) 摘要 L一肉碱是参与生枷体新陈代谢的重要物质，本文简要介绍和比较 了检测肉碱的7 种主要方法，即生物法、化学法、酶法、荧光法、高压液相色谱法、NMR和放射酶法，其中 以酶法 、荧光法和高压液相色谱法较为常用。 关键词 L一肉碱 生理功能 检测 、— — — — — 一 — — — — — — 一 一 L一内碱 (L—carnitine)是一种广泛存在于 自 的毒性 I另外，还能有效防止运动后血中乳酸浓 然界 中，可由生物体 自身合成的生理活性物质 ， 度的升高，以降低高乳酸引起的疲劳效应 ]。 以肌 肉组织 中含量较高。有人研究发现L一肉碱 可见，L一肉碱是生物体生长发育和防治疾 是大黄粉虫 (Tenebriomolitor)幼虫的必需生长 病的重要物质 了解食品、饲料和生物体内的内 素，故又名维生素B 口]。肉碱的分子结构为L— 碱含量非常重要，它可为肉碱的广泛应用提供 羟基一7一三 甲铵丁酸 (L一~-hydroxy一7一butyro— 理论依据和数据，从而使之更好地服 务于人 betaine)，类似于胆碱、甜菜碱的结构 口。 类 。 L一肉碱 的对映异 构体 肉碱及 消旋体 内碱的检测方法国外研究得 比较 多，国内 DL一肉碱为人工合成物质，D一内碱不但不具备 这方面的文献还不多见，下面对国外内碱检测 L一肉碱的生理活性 ，且抑制其活性 ，非特别注明 方法的研究作一筒要介绍。 时所提到 内碱指的就是 L一肉碱0。 1 生物法 至今 已发现 内碱的生理作用有 ： (1)L一内碱是一类参与机体能量代谢的物 生物法是 由Fraenkel和 Friedman于 2o 质 。 世纪 50年代首次提出的，他们选择了以内碱为 L一肉碱将长链脂肪酸从线粒体的膜外运至 必需生长因子 的大黄粉虫为材料 ，对测试组的 膜内，促进脂肪酸的 氧化作用 ，另一方面它以 幼虫饲喂含待测样品的饲料 ，对照组饲 喂含 已 酰基 内碱的形式将线粒体 内的短链酰基运至膜 知数量 内碱的饲料 ，通过 比较两组间幼虫的生 外，起调节线粒体 内乙酰 CoA／CoA 比率的作 长和存活情况来测定样品中的肉碱含量。 用，二者的比率上升时，会因抑制丙酮酸脱氢酶 该方法中存活期达 70天 ，体重达 60mg的 系的活性而影响能量代谢 。同时L一内碱为脂肪 幼虫需饲喂每克含 肉碱 0．35x／g的饲料0∞。之 酸的合成提供乙酰基原料r。 后，Travassos．LR等人在此基础上提出了类似 (2)L一内碱可将体内过量和非生理性的酰 原理 的检测法，用有孢酵母 Torulopsisbovina 基排除体外，以消除酰基积累导致的代谢毒性。 (ATcc26o14)的肉碱营养突变体代替大黄粉 (3)L一内碱可参加支链氨基酸如亮氨酸、 虫进行测定 ，当控制酵母的接种量、培养基量和 异亮氨酸和缬氨酸代谢产物的运输 ，从而有利 培养时间至一定水平时，酵母的生长情况与肉 于这些氨基酸的正常代谢 “a_ 碱浓度成正相关，与前者相 比缩短 了检测周