辽细辛中十二碳四烯酰胺A,B的定性及定量分析研究.pdfVIP

2015年2月I第4JD卷第4期 点．麓蠡蠹 Vo1．40，No．4IFebmary，2015 辽细辛中十二碳四烯酰胺 A，B的定性及定量分析研究 谢德媚 ，刘广学 ，徐风 ，尚明英 ，张子为 ，王璇 ，蔡少青 (1．北京大学 药学院 天然药物与仿生药物国家重点实验室，北京 100191； 2．北京大学 药学院化学生物学系，北京 100191) [摘要] 建立辽细辛中2个主要的直链酰胺成分十二碳四烯酰胺 A与十二碳四烯酰胺B的定性与定量分析方法，并测定其 在42份辽细辛(37份不同年份收集的北细辛及5份汉城细辛)中的含量。利用HPLC-IT-TOF—MS／MS技术结合对照品鉴定北 细辛甲醇提取液中的十二碳四烯酰胺 A与B；对2种成分的含量测定采用超高效液相色谱 ·二极管阵列检测器 (UPLC—PDA)， ACQUITYUPLCBEHC 色谱柱 (2．1mln×100mm，1．7 m)，流动相为纯水一乙腈，梯度洗脱 ，柱温45℃，检测波长254nm。结 果表明，HPLC—IT-TOF．MS／MS鉴别细辛中十二碳四烯酰胺A、B的准分子离子[M+H]为m／z248．20；2种成分在UPLC—PDA 上分离度良好，在检测范围内呈良好线性 ，平均加样回收率为97．90％和99．86％。在所测定辽细辛样品中，十二碳 四烯酰胺 A的含量为0．11—3．89mg·g～，十二碳 四烯酰胺B为0．24～6．65mg·g～。含量测定结果显示随着贮藏时间的延长，十二 碳四烯酰胺A与十二碳四烯酰胺B的含量均呈现降低的趋势，与2013年收集样品相 比，2002～2003年收集样品中两者的平 均含量分别降低34％和36％；这2种成分在汉城细辛中的平均含量[十二碳四烯酰胺 A：(0．78±0．52)mg·g～；十二碳 四烯 酰胺B：(1．69±0．83)mg·g ]均显著低于北细辛[十二碳四烯酰胺A：(1．59±0．75)mg·g～；十二碳四烯酰胺 B：(2．90± 1．17)mg·g ](P0．05)；辽细辛地上部分十二碳 四烯酰胺 A的含量为0．11～0．33mg·g～，十二碳四烯酰胺 B含量为 0．24～0．60mg·g～，两者的含量均明显低于同一植株的地下部分 (分别为0．73—3．89，2．11～6．24mg·g )。本方法快速 简便、结果准确，对2种直链酰胺类成分可达到良好的分离并满足含量测定的要求，可用于辽细辛药材中这2种成分的定性与 定量分析，为辽细辛药材质量控制方法的进一步提高提供依据。 [关键词] 辽细辛；HPLC．IT．TOF．MS／MS；UPLC；十二碳四烯酰胺A；十二碳四烯酰胺B Qualitativeandquantiattiveanalysisofdodecatetraenamides A ．B inAsariRadixetRhizoma XIEDe．mei。 LIU Guang．xue ，XU Feng ，SHANG Ming-ying ，ZHANG Zi-wei ，WANG Xuan ，CAIShao．qing ， (1．StateKeyLaboratoryofNaturalandBiomimeticDrugs，SchoolofPharmaceuticalSciences，PekingUniversity，Beijing100191，China； 2．DepartmentofChemicalBiology，SchoolofPharmaceutcialSceinces，PekingUnive~i@，Beijing 100191，China) [Abstract] TodevelopananalyticmethodforqualitativeandquantitativenaalysisofdodeeatetraenamidesA，Bin42samplesoftwo officialspeciesofAsariRadixetRhizoma(ARR)(37smaplesofAsarumheterotropoidesvaLmandshuricumwithdifferentcollection timeand5sma plesofAsarum seiboldiivar．seoul