山东地方家禽品种MHC+B-F基因遗传变异和免疫性状的关系.pdfVIP

12也National 34 ofthe onAnimalGeneticMarkers Proceeding Symposium 山东地方家禽品种MHCB．F基因遗传变异与免疫性状的关系 王t}￡波1，一，李福伟1，一，雷秋霞m，韩海霞1．一，李桂明1，一，周艳1，一，曹顶国1，2+ (1山东农业科学院家禽研究所，济南250023：2山东家禽育种工程技术研究中心，济南 250023；3青岛农业大学动物科技学院，青岛266109) 引言 鸡的主要组织相容性复合体(MHC)由一组紧密连锁的、高度多态的基因座位所组成，其 B区共包括B．F、B．L和B．G3个座位，它所编码的细胞表面糖蛋白抗原，也称MHC分子， 在机体的移植排斥反应、抗原递呈、免疫应答和调控等方面具有极其重要的作用。本研究选 取MHC基因中已被证明对鸡若干传染性疾病的抗性和易感性有很大的影响的高度多态的 B-F exon2，利用PCR．SSCP技术，寻找其SNP突变位点，选择绵羊红细胞免疫抗体滴度和禽 流感、新城疫的免疫抗体滴度为主要目标性状，研究山东地方家禽品种MHCB．F基冈遗传 变异与免疫性状的关系，为开展山东地方品种的抗病育种工作奠定基础。 材料方法 选取同期孵化出雏的山东地方品种鲁禽鸡、石岐杂鸡和琅琊鸡各100只，在相同饲养条 件和免疫程序下饲养。利用Primer 3。8ul，2×mix 引物0．2ul，下游引物0．2ul，ddH20 5ul。反应程序：94℃预变性3min，94C变性 采血，采用血凝和血凝抑制方法测定禽流感H5和H9和新城疫的抗体滴度，125日龄测定SRBC 抗体滴度。SAS统计软件对不同SNP突变位点不同基因型的免疫性状进行显著性检验和多重 比较。 结果 在100只鲁禽鸡B—Fexon2序列中检测到56个SNP，引起29个氨基酸突变；在100只琅琊 鸡中检测到47个SNP，引起26个氨基酸突变：在100只石岐杂鸡中检测到40个SNP，引起26 个氨基酸突变。对三个品种MHCB．F区基冈外显子2的SNP位点与免疫性状进行关联分析， ND抗体滴度显著相关，218位点与H5抗体滴度显著相关，245位点与H9抗体滴度显著相关； 体滴度显著相关，217位点与H5抗体滴度显著相关，249位点与H9抗体滴度显著相关：石岐 杂鸡的有义突变中128、179、183位点与ND抗体滴度显著相关，214位点与H5抗体滴度显著 相关，183、194位点与H9抗体滴度显著相关。 讨论 本研究检测B．Fexon2具有高度的多态性，通过与SRBC抗体滴度、特异性免疫抗体(ND、 AI)的关联分析表明其多态性与所测免疫性状在三个品种中均存在不同程度的显著相关，其 中发现多个SNPs位点与AI、ND和SRBC抗体滴度相关，说明MHCB．F区基因exon2与AI、 ND和SRBC抗原的抗体产生有着较强的相关性。各位点的SNP在三个品种中出现的位点不相 同，说明SNP与品种有一定的相关。本研究得到的不同的SNP突变位点将为山东地方家禽品 种的抗病育种工作提供理论基础。 ·通讯作者：曹顶国(1973．)，男，汉，山东嘉祥人，副研究员，硕士，主要研究方向：家禽遗传育种。 Email：jqsyzs@163．com。