抗人血小板单克隆抗体的制备及其临床应用_牟忠梅.pdfVIP

中国生物制品学杂志2011 年6 月第24 卷第6 期 Chin J Biologicals June 2011 ，Vol. 24 No. 6 · · 699 【诊断制品】 抗人血小板单克隆抗体的制备及其临床应用 1 2 1 3 1 1 牟忠梅 段生宝 刘颖 李春明 陈喜朋 李勇 【摘要 】 目的 制备抗人血小板单克隆抗体，并应用于临床血小板抗体的筛检及血小板交叉配型。方法 以人O 型血小 板为免疫原，免疫BALB ／ c 小鼠，将NS-1 细胞与免疫小鼠脾细胞融合，间接ELISA 法筛选阳性杂交瘤细胞，有限稀释法克隆，并 对阳性杂交瘤细胞及其分泌的单克隆抗体进行鉴定；采用亲和层析法纯化单抗，用该单抗建立固相凝集法，检测临床患者血清 样本，并与德国欧蒙公司的同类试剂盒（MASPAT）检测结果进行比较。结果 获得1 株抗人血小板杂交瘤细胞株 1C ，其分泌的 1 6 单抗性能稳定，可特异性针对人血小板糖蛋白Ib ／ IX ，细胞稳定传代8 个月以上，培养上清效价大于为 1 ∶ 10 ，37℃ 的稳定性可 8 持续35 d ，纯化后的抗体效价可达1 ∶ 10 。建立的固相凝集法对50 例临床血清样本的检测结果与同类试剂盒（MASPAT）一 致。结论 已制备了抗人血小板单克隆抗体，为其进一步临床应用奠定了基础。 【关键词】 血小板；抗体，单克隆 【中国图书分类号】R392-33 【文献标识码】A 【文章编号】 1004-5503 （201 1）06-0699-03 Preparation and Clinical Application of Anti-Human Platelet Monoclonal Anti－ body △ △ MU Zhong-mei ，DUAN Sheng-bao ，LIU Ying ，LI Chun-ming ，CHEN Xi-peng，LI Yong （Changchun Brother Biotech Co． Ltd ，Changchun 130012，China） 【Abstract 】 Objective To prepare anti-human platelet monoclonal antibody （McAb）used for clinical screening of platelet an－ tibody and cross matching of platelet． Methods BALB ／ c mice were immunized with platelet group O as immunogen ，of which the splenocytes were fused with NS-1 cells． Positive hybridoma cells were screened by indirect ELISA and cloned by limiting