龙眼肉多糖硫酸酯化修饰抗肿瘤活性细胞凋亡.doc

龙眼肉多糖硫酸酯化修饰及修饰前后体外抗肿瘤活性初步研究 药物化学， 2011， 硕士 【摘要】 目的:从龙眼肉中提取、纯化得到龙眼肉多糖,对其进行硫酸酯化结构修饰,并测定修饰前、后龙眼肉多糖的体外抗肿瘤活性。方法:通过热水浸提法提取龙眼肉多糖,Sevag-木瓜蛋白酶法除龙眼肉多糖蛋白,H2O2法除龙眼肉多糖色素,苯酚-硫酸法测龙眼肉多糖的多糖含量,DEAE-纤维素柱层析纯化龙眼肉多糖,龙眼肉多糖A的纯度用醋酸薄膜纤维电泳和比旋光度法检测,采用浓硫酸法对龙眼肉多糖A进行硫酸酯化结构修饰,L9（34）正交设计对浓硫酸法的反应温度、反应时间及正丁醇与浓硫酸的反应试剂等条件进行优选,硫酸钡-比浊法测定其硫酸基含量,DEAE-纤维素柱层析纯化硫酸酯化龙眼肉多糖（LYRP4-1）,通过凝胶色谱法测定龙眼肉多糖A和LYRP4-1的分子量,MTT法体外测定龙眼肉多糖A和LYRP4-1对鼻咽癌HONE1细胞的抑制作用,苏木素-伊红染色和流式细胞仪观察鼻咽癌HONE1细胞凋亡情况。结果:热水浸提法的龙眼肉多糖得率为6.30%,龙眼肉总糖含量为58.72%。龙眼肉多糖清除蛋白率为52.30%。DEAE-纤维素柱层析纯化流分龙眼肉多糖A得...?更多还原 【Abstract】 Objective: To sulfat the purified polysaccharide from Arillus Longan and investigate the antitumor activities of the primitive polysaccharide and its sulfated derivative in vitro.Methods:?The polysaccharide was extracted with hot water from Arillus longan. The total sugar content of crud polysaccharide was determined by using the phenol-sulfuric acid method. The polysaccharide was purified by the deproteinizing of enzyme-sevag method and the decolouring by H2O2.?The polysaccharide was further pu...?更多还原 【关键词】 龙眼肉多糖； 硫酸酯化修饰； 抗肿瘤活性； 细胞凋亡； 【Key words】 Polysaccharide of Arillus Longan； Sulfation； Antitumor activity； Apoptosis； 摘要 6-8 ABSTRACT 8-10 第一章 前言 11-13 1.1 龙眼研究意义 11-12 1.2 本课题的立题依据 12-13 第二章 龙眼肉多糖分离、提取及纯化 13-28 2.1 实验试剂、仪器与材料 13-14 2.2 实验方法 14-19 2.3 实验结果 19-25 2.4 实验讨论 25-28 第三章 正交优化龙眼肉多糖硫酸酯化反应条件研究 28-42 3.1 实验试剂、仪器和材料 28 3.2 实验方法 28-32 3.3 实验结果 32-39 3.4 实验讨论 39-42 第四章 龙眼肉多糖A 和LYRP4-1 体外肿瘤活性研究 42-59 4.1 实验试剂、仪器与材料 42-43 4.2 实验方法 43-47 4.3 实验结果 47-55 4.4 实验讨论 55-59 全文总结 59-61 参考文献 61-65 综述 65-76 参考文献