miRNA在白血病干细胞中的表达谱.pdfVIP

． 3150． 查垦堂 !! 旦笙 鲞笙 塑 竺 ! M—edic—alJou ! t2014,Vo1．35，No．20 l1名 静 祀_ miRNA在 白血病干细胞中的表达谱 耿其荣 ，文海军 ，陈晓勤 ，王华 ，王亮 ，王维达 ，吕跃 中山大学肿瘤防治中心、华南肿瘤学国家重点实验室 血液肿瘤科，实验研究部(广州510060) 摘【要】 目的 观察miRNA在人骨髓白血病干细胞中的表达情况。方法 以从人骨髓中分离培养的骨髓 白血病干细胞为实验对象，用MirVaNa试剂盒分离提取细胞 内小RNA。用Agilent2100分析仪分析其完整性和含 量。用Agilent人miRNAV12芯片分析miRNA的表达。结果 复苏后存活的单核细胞经流式分选出的白血病干 细胞群 比例为 1．58％，细胞数为 2．5×10 个。分选 出的白血病干细胞抽提得到 3 g的总 RNA。利用安捷伦 miRNA芯片一共检测到81个人源miRNA的表达。其中，表达量最高的10个miRNA分别是miR一233、miR一21、 miR一142、miR一720、miR一23a、let一7f、let一7a、miR一16、miR一15a和 miR一19b。利用 TargetScan软件 ，预测这 10个表达量最丰富的miRNA共有2147个靶标基因。初步进行功能富集分析，发现这些miRNA所调控的基 因主 要集中在转录调控、生物合成、跨膜运输、免疫系统发育、淋巴系和髓 系细胞分化等方面。结论 筛选出了在人骨 髓白血病干细胞中表达的miRNA，为其参与调控 白血病干细胞的增殖分化提供 了依据，同时为miRNA在白血病 干细胞中潜在应用奠定基础。 【关键词】 miRNA；急性髓系白血病；白血病干细胞 ExpressionprofileofmicroRNAsinhumanleukemicstemcells． GENGQi—rong ，WENHai-jun，CHENXiao— qin，WANGHua，WANGLiang，WANGWei—da，￡ Yue． DepartmentofHematology，StateKeyLaboratoryofOncology inSouthChina，CancerCenter，SUN Yat—senUniversity，Guangzhou510060，China 【Abstract】 0bjective ToidentifytheexpressionofmiRNAsinleukemicstemcells(LSCs)．Methods LSCs wereobtainedfrompatientswithacutemyeloidleukemia(AML)．SmallmolecularRNAswereextractedusingmirVana miRNA isolationkit．ThemiRNA expressionwasanalyzedwithAligentmiRNA profilingassay．Results A totalof2．5× 10 LSCswereisolatedfrom AMLbonemarrow，and3 goftotalRNA wereobtained．AccordingtoAligentmieroarray screening，81humanmiRNA wereobtained．Thetop 10 weremir一233，mir一21，mir一142，mir一720，mir一23a， let一7f，let一7a，mir一16，mir一15aandmir一19b．Conclusion Thesefindingsindicatethatalargediversepopulation ofmiRNAsarelikelyimportantregulatorsforLSCsinmaintainingtheirstateofdifferentiation，andhavepotentialvaluein stem cellsresearch． 【Keywords】 mieroRNAs；acutemyeloidleukemia；leukemicstemcells 白血病是一组造血细胞恶性增生的克隆性疾病， 胞中潜在应用奠定基础。 60％ ～80％患者经联合治疗能获得完全缓解 ，但大多 1 资料与方法 数患者终