产_内酰胺水解酶菌株的筛选及发酵条件研究.pdfVIP

46 卷 　4 期 ( ) 微 生 物 学 报 46 4 :571～575 2006 年 8 月 4 日 Acta Microbiologica Sinica 4 August 2006 γ 产 - 内酰胺水解酶菌株的筛选及发酵条件研究 1 1 2 2 1 李海泉 ,苏 　磊 ,杨 　柳 ,王建军 ,郑国钧 ( 1 北京化工大学制药工程系　北京　100029) (2 中国科学院微生物研究所 微生物资源国家重点实验室　北京　100080) ( ) γ ( ) ( ) 摘 　要 : - - 内酰胺是合成两种抗艾滋病药物 - carbovir 和 - abacavir 的重要原料 ,具有重要的应用价值 ,微 ( ) γ ( ) γ 生物酶法拆分 + - - 内酰胺生产 - - 内酰胺的方法具有良好的应用前景。以N- 乙酰苯丙氨酸为唯一碳源 ,从 土壤中筛选得到了 69 株具有酰胺水解酶活性的菌株 ,利用液相色谱分析方法确定了其中 20 株有较高的酰胺水解 ( ) γ ( ) γ 酶活性 ,利用手性色谱分析的方法进一步得到了一株具有较高立体选择性 ,能拆分 + - - 内酰胺而获得 - - 内酰胺的菌株L29-9 ,对该菌株的产酶培养基的碳、氮源及初始 pH 值等进行了研究。结果表明 :当选择碳源柠檬酸 ( ) γ 2gL 、氮源酵母提取物 5gL 、pH 70 、培养时间40h 时 ,通过完整细胞转化 ,在 30 ℃下经过 12h 的反应 ,产物 - - 内 酰胺产率达 40 % ,ee 值 995 % 。 γ 关键词 : - 内酰胺; 2-氮杂双环- [221 ]-庚烷-5- 烯-3- 酮 ; 拆分 中图分类号:Q936 　　文献标识码 :A 　　文章编号 (2006) ( ) ( ) ( ) ( ) [3 ] 　　 - abacavir 图 1 :A 和 - carbovir 图 1 :B 是 ( ) γ Stephen 等利用内酰胺酶对拆分 + - - 内酰胺 两种强力的抗艾滋病药物 ,这两种手性药物均能以