穿膜肽TAT和脑肿瘤靶向肽T7双修饰脂质体的制备和体外靶向性评价.pdfVIP

·l04 · 药学学报 ActaPharrnaceuticaSinica2015，50(1)：104-110 穿膜肽 TAT和脑肿瘤靶向肽 T7双修饰脂质体的制备和 体外靶 向性评价 袁端锋 一，宗太丽 ，高会乐 ，何 勤 (1．四川大学华西药学院，靶向药物与传递系统教育部重点实验室，四川 成都 610041； 2．四川天联药业有限公司，四川 成都 610000) 摘要：本文旨在制备T7肽和穿膜肽 TAT双修饰的脂质体 (T7andTATdualmodifiedliposomes，T7．TAT-LIP) 用于血脑屏障和脑肿瘤细胞双级靶 向药物递送。研究以CFPE为荧光探针，T7修饰的PEG—DSPE、TAT修饰的 PEG—DSPE、卵磷脂、PEG—DSPE和胆固醇为材料，采用成膜水化法制备脂质体，对 T7浓度、TAT浓度、连接 T7和TAT的PEG长度进行优化，表征其粒径、zeta电位、形态和稳定性。以bEnd_3细胞和 C6细胞为模型，考 察T7．TAT-LIP的细胞摄取能力，表征其穿过血脑屏障和脑肿瘤细胞靶向能力。结果表明，T7用量为脂质的6％、 修饰T7所用PEG链长为2000、TAT用量为脂质的0．5％、修饰TAT所用PEG链长为 1000时所得到的双修饰脂 质体被 C6细胞摄取能力最强。优化后T7一TAT-LIP粒径为 1l8nm，zeta电位为一6．32mV,透射电镜下形态圆整 。 脂质体在PBS中较为稳定，37℃放置24h，浊度和粒径无明显变化；4～8℃放置 1个月，粒径和PDI无明显变化。 在不同时间点，bEnd．3和 C6细胞摄取 T7．TAT-LIP的强度均高于单配体修饰脂质体，且随着孵育时间提高，摄取 浓度逐渐提高。这些结果说明，双修饰脂质体具有血脑屏障和脑肿瘤细胞双级靶向能力，且效果优于单配体修饰 脂质体。 关键词：脂质体；穿膜肽；血脑屏障；脑肿瘤 中图分类号：R943 文献标识码：A 文章编号：0513-4870(2015)01-0104—07 CellpenetratingpeptideTAT andbraintumortargetingpeptideT7dual modifiedliposomepreparationand ／nvitrotargetingevaluation YUANDuan．feng一，ZONGTai．1．i．，GAOHui—le，HEQin (，KeyLaboratoryofDrugTargetingandDrugDeliverySystems，MinistryofEducation，WestChinaSchoolofPharmacy SichuanUniversity,Chengdu610041，China, 2SichuanTianlianPharmaceuticalCo．，Ltd,Chengdu610000,China) Abstract：ThepurposeofthisstudyistoprepareT7and ，dualmodifiedliposomes(T7． LIP)to penetratethroughbloodbrainbarrierandtargettobraintumorcells． TheliposomeswerepreparedwithCFPE， T7modifiedPEG．DSPE．TAT modifiedPEG．DSPE．soybean phospholipid，PEG—DSPE andcholestero1． The CFPEwasusedtotrackthecellularuptakeefficiency． ThedensityOfT7andT andthelengthofPEGwere optimized，andthentheliposomeswerecharacterizedbyparticlesize，zetapotential，morphologyandstability~ Afterwards，thecellularuptakebybEnd，3an