微生物激发子对竹黄产竹红菌素的影响.pdf

食用菌学报@2014．21(4)：23~26 文章编号 ：1005—9873(2014)04—0023—04 微生物激发子对竹黄产竹红菌素的影响 杜 文 ，田维毅 ，王 平 ，王文佳 ，韩 洁 ，高小娇 ，曾 茜 ，郁建平 ，韩燕峰。，梁宗琦。 (贵阳中医学院基础医学院，贵州贵阳 550002；。贵州大学生化营养研究所 ，贵卅l贵阳 550025； 。贵州大学真菌资源研究所 ，贵州贵阳 550025) 摘 要 ：用竹黄 (Shiraiabambusicola)寄生 的竹枝、叶、根为材料分离 内生菌，再通过竹红菌素的抑菌效果和发 酵试验初筛发现获得的4个 内生细菌和2个 内生真菌的粗多糖激发子都能一定程度提高竹黄菌丝中竹红菌素 的含量，其中最有效的为TT1(Trametessp．)栓菌属真菌的激发子。在竹黄培养液中加入 50t~g／mL的TT1 激发子可明显提高竹黄菌丝生物量和菌丝 中竹红菌素含量 ，与对照相 比竹红菌素增产约 80％。 关键词 ：竹红菌素 ；竹黄 ；激发子 在植物培养过程 中，加入一些生物 的(如细 的影响。 菌、真菌及其细胞壁裂解物)或非生物的 (如重金 1 材料与方法 属 、紫外光等)因子 (激发子)为特定 的信号 ，能快 速 、专一和有选择地诱导特定基 因表达 ，从而调 1．1菌株、培养基及药品 节次生代谢产物的合成，这样 的操作在一些植物 竹黄 (S．bambusicola)GZUIFR-08K1菌 中已取得了成功并具有商 品化应用潜力 [1]。利 株[8]、分离 白竹子的 内生菌和金黄色葡萄球 菌 用激发子促使微生物细胞快速、大量合成有用次 (fpyfocDcc“aureus)均保存于贵州大学真菌 生代谢产物也已成为受到重视的新方法_2]。 资源研究所。竹红菌素的标准 品 (纯度 98％以 竹黄 (Shiraiabambusicola)是竹子 的寄生 上)由贵州大学生化营养研究所提供 ；其它试剂 菌 ，归为假球壳 目、新建 Shiraiaceae科 中的一个 均为分析纯 。查氏培养基 、PDA培养基和牛肉膏 独立的属 (Shiraia)[3]，其产生的茈醌类竹红菌素 蛋 白胨培养基按文献 [-93配制 。 是一种光敏色素物质 ，具有抗炎、镇痛 、抗菌、光 1．2竹 内生菌分离纯化 敏杀伤肿瘤细胞 、减轻毒副作用、治疗微血管类 取生长有竹黄子实体 的新鲜竹子 的根、茎 、 疾病和纤维化症等作用 ]。竹黄作为传统 的名 叶(采 自浙江省桐庐县)，经 自来水冲洗干净后 ， 贵中药基本上都是野生 的，产量和质量都不稳 70％的酒精消毒 5min，无菌水冲洗 4次，再用 定。目前 ，国内对液体培养基组分和培养条件提 0．1％升汞消毒 2min，无菌水冲洗 4次 ，将叶切 高竹红菌素产量 的研究报道较多[56]，涉及 内容 成 0．5cm ×0．5cm大小，根横切每段 1cm，茎横 包括温度、水分 、装液量 、接种量 、转速和培养时 切每段 1cm 后纵切，将组织材料分别接种于 间及碳源、氮源、碳氮 比、微 量元 素、生长因素等， PDA培养基和牛 肉膏蛋 白胨培养基上 ，26℃和 但对于微生物激发子对竹黄的生长及产竹 红菌 37℃恒温黑暗培养 ，4d和 2d后挑取不同形态 素的影响则几乎未见报道。有研究表明，增加一 的菌落转接 2～3次 ，经镜检无杂菌即得 到纯化 些有效 的刺激物——激 发子可在微生物发酵获 的真菌和细菌菌株 。 得不一样的代谢物 ]。因此 ，笔者分离 了有竹黄 1．3抑菌圈的测定 寄生的竹枝 、叶和根 中的 内生菌 ，制备其粗多糖 将竹红菌素的标