PIK3R1对多发性骨髓瘤细胞侵袭转移的影响及其机制初探.pdfVIP

134 陕西医学杂志2015年 2月第 44卷第 2期 PIK3R1对多发性骨髓瘤细胞侵袭转移的影响及其机制初探 西安交通大学医学院第一附属医院血液科 (西安 710061) 吴 迪 刘亚林 王梦昌▲ 摘 要 目的：观察应用 RNA干扰 (RNAi)技术敲低 PIK3R1表达后在体外对人类多发性骨 髓瘤细胞系RPMI8226细胞侵袭的抑制作用。方法：将重组质粒表达载体 pGenesil—1．1-PIK3R1 转染至 RPMI8226细胞 。RealtimePCR和 Westernblot分别检测转染前后 目的基 因mRNA和蛋 白的表达水平，酶联免疫吸 附试验 (ELISA)检测细胞外基质金属蛋 白酶 (MMP)一2、MMP一9的浓度 变化。Transwell实验评价肿瘤细胞侵袭能力的变化 。结果：pGenesil一1．1-PIKdR1可以有效抑制 PIK3R1mRNA 及 蛋 白的表 达，MMP一2、MMP一9表达 下调，基质金 属 蛋 白酶组织抑制 因子 (TIMP)一2表达上调 ，ELISA证 实细胞外 MM9—2、MMP一9浓度在治疗组明显减低 。Tramwell穿 过细胞数 ：对 照组 (115．5±3．9)和无义序 列组 (112．8±6．0)，pGenesil—1．I-PIK3R1转染组 (73．7 ±4．0)。结论 ：靶向PIKdRI的 RNAi技术可以序 列特异性地抑制 PI3KR1表达，在体 外明显抑制 RPM18226细胞 的侵袭 能力 。 主题词 多发性骨髓瘤 肿瘤转移 基 因治疗 @PIK3R1 【中图分类号1 R733．3 【文献标识码 】 A doi：10．3969／j．issn．1000—7377．2015．02．002 Experimentalstudyon targetingPIK3R1byRNAisuppressing M ultipleM yelomainvasion andmetastasisin vitro DepartmentofHematology，FirstAffiliatedHospitalofM edicalCollege ofXi’anJiaotongUniversity (Xi’an710061) WuDi LiuYalin W angM engchang ABSTRACT Objective：ToobservetheinhibitoryeffectsontheinvasionandmetastasisofMultipleMyelo— maRPM I8226cellslinebysmallhairpinRNA targetingPIK3R1invitro．M ethods：Therecombinantplasm idvector expressionvectorwhichcontainedPIK3R1shRNA wastransfectedintoRPM I8226cells．Real—timePCRandW estern blotwereusedtodetecttheexpressionofPIKdR1．EIESAwasusedtomeasurethechangeintheMMP2／MMP 9 expression．Theinvasion abilityofthetumorcellswasexaminedbyTranswelltests．Resuits：pGenesil1．卜PIK3R1 mediatedshRNA targetingPIK3R1dramaticallydown—regulated theirexpression inRPM I8226 cells．M MP一2and MMP 9weredownregulated。andTIMP 2wasupregulated．TheextracellularlevelsofMMP一2andMMP9werede creased．Transwellshowedthatthenumberofcellsinvading throughthematrigelin control，nonsen