DNA疫苗的作用机制及影响因素.pdfVIP

维普资讯 现代 医药卫生2008年 24卷第 11期 l65l DNA疫苗的作用机制及影响因素 张洪利 ，王金香 ，康大力 (广 东食品药品职业学院，广东 广州 510520) 文章编号 ：1009—5519(2008)11-1651—02 中图分类号 ：R9 文献标识码 ：A DNA疫苗(DNAvaccine)是1990年从基因治疗(geneticthera． 贝地扩增 。而在宿主细胞f真核细胞)内则能高效表达且不复制 ， py)研究领域发展起来的一种全新疫苗 ，也称核酸疫苗(nucleic 也不含有 向宿主细胞基因组内整合的序列。用于构建DNA疫苗 acidvaccine)。DNA疫苗是把含有编码某种抗原蛋 白的外源基 的载体主要有质粒、细菌或病毒 ，大多采用质粒作载体。用于构 因克隆到真核质粒表达载体上 ，然后将重组质粒直接导人动物 建DNA疫苗的质粒载体及其组件 。直接影响质粒DNA的转化或 细胞 内。并通过宿主细胞 的转录系统使外源基因在动物体 内表 转染效率和外源抗原蛋 白在哺乳动物细胞 内的表达量 。进而影 达抗原蛋 白，从而诱导宿主产生对该抗原蛋 白的免疫应答 。以 响在免疫机体 内诱导的免疫反应 。因此应选择高效的哺乳动物 达到预防和治疗疾病 的 目的。DNA疫苗可激起机体特异性免疫 细胞表达载体 ，如 pSV2。pcDNA3．0等 。DNA疫苗质粒载体至少 应答 ，免疫期长 ，具有生产成本低 ，易于大规模生产和保存等优 包括3个主要的部件 ：(1)可以在细菌体 内复制扩增 ，得到大量 点．是具有应用前景的新一代疫苗。但相对于传统疫苗而言， 的拷贝；(2)原核生物选择性标记基因，如抗生素抗性基因，以 DNA疫苗所激发的免疫反应强度相对较弱 ．不足 以引起足够 的 筛选含有质粒DNA的阳性细菌克隆(菌株)；(3)可在真核生物细 免疫保护效果 ，尤其对人类以及大动物的免疫试验Ⅲ。因此研究 胞中表达的强启动子、增强子、选择性标记 、终止子、内含子、转 DNA疫苗的作用机制、影响因素对该疫苗的发展应用至关重要 。 录终止序列、polyA等转录调控元件 。 1 DNA疫苗的作用机制 3 DNA疫苗的免疫方法 关于DNA疫苗免疫机制 。到 目前为止还不十分清楚 。研究 3．1 以质粒为载体的DNA疫苗 证 明 。DNA疫苗诱导产生 的免疫反应既包含了体液免疫能力 3．1．1 直接采用注射、口服或喷鼻等方法吸收质粒DNA：质粒 (即特异性抗体)，也包含 了具有较长记忆时间和细胞杀伤力的 DNA可 口服、喷鼻或直接从肌 肉、皮下、腹腔、静脉等注射 ．都取 细胞免疫反应 。一般认为核酸疫苗被导人机体后 ，被周 围的组 得 了不同程度 的成功。目前大多数研究者认为 61，横纹肌系统 织细胞(如肌细胞)、抗原递呈细胞(APC)或其他炎性细胞摄取。 是最有效的摄取外源基因表达蛋 白抗原的组织。静脉注射质粒 肌细胞等组织细胞摄取的质粒DNA分子随后在细胞核 内转录 DNA表达载体 ，可使几乎所有组织发生转染 ，其中肺 、脾外源基 为mRNA，再被移至细胞质 内翻译成抗原蛋 白分子 。分泌 出细 因表达率最高 。质粒DNA还可 以通过 口服、滴鼻或喷鼻等方法 胞释放到组织间隙的抗原蛋白分子 。被抗原递呈细胞(APC)捕 吸收。Okada等1~1997年 向小 鼠鼻内滴注含编码HIV—l抗原的 获，加工处理成为抗原肽递呈给T细胞 ，启动免疫反应 。外周淋 DNA载体 ，在小 鼠体 内诱导产生 了高水平 的免疫反应 。此外 ， 巴器官 的APC也会直接摄取核酸疫苗 。表达抗原并递呈给T细 Heckert等 0o2年报道将共表达 的质粒与二甲基亚砜 以1：1混 胞，触发