HIF-1α基因沉默对食管鳞癌细胞功能性基因的影响.pdfVIP

f【i乃 药2008年 48罄 42蝴 HIF一1 基因沉默对食管鳞癌细胞功能性 基因的影响 肖 斌，施瑞华，杜琰萍，郝 波，林 艳 (南京医科大学第一附属医院，江苏南京210029) [摘要] 目的 观察食管鳞癌细胞中缺氧诱导因子一1 (HIF一1d)基因与血管内皮生长因子(VEGF)、血红素 加氧酶(HO一1)、基质金属蛋白酶-2(MMP一2)基因之问的关系及其对细胞周期的影响。方法 以HIF一1Or．基因沉默 的Eca一109细胞、化学模拟缺氧细胞及未干预细胞为研究对象，通过 Westernblot检测 VEGF、HO一1、MMP-2基因在 三种细胞中的表达差异以了解其与HIF·1基因的关系，并通过流式细胞术分析了解 HIF—l 基因沉默后细胞周期 的变化。结果 Westernblot检测发现，同空白及模拟缺氧组比较，HIF一1 基因沉默后 HIF一1 蛋白表达明显下调， 同时VEGF、HO-1、MMP·2的蛋白表达均出现了明显下降。流式细胞分析表明，HIF-1 基因沉默后的Eca．109细胞 组同对照组相比G。、G。期细胞明显增加，G 、M期细胞变化不大，s期细胞比例明显减少。结论 HIF。1a与上述三 种基因存在明显相关性，进而可能影响着食管鳞癌的血管生成 、侵袭、应激保护等生物学行为，HIF—ld沉默可将食 管鳞癌细胞阻滞于G 、G。期。 [关键词】 食管肿瘤 ；RNA干扰；缺氧诱导因子一1；血管内皮生长因子；血红素加氧酶；基质金属蛋白酶-2 [中图分类号] R735．1 [文献标识码] A [文章编号] t002．266X(2008)46-0022-03 Influenceonfunctioninggenesinesophagealsquamous cancercellafterHIF一1agenesiliencing XIAO Bin，SHIRui—hua，DU Yan-ping，HAO Bo，LIN Yah (FirstHospitalAffiliatedtoNanjingMedialUniversity，Na ng210029，P．R．China) Abstract：Objective Todeterminatecorrelationsofhypoxia—induciblefactor一1 withVEGF，HO一1，MMP一2genes andcellcycleinesophagealsquamouscancercel1．Methods WesternblottingwasusedtOexaminetheexpressionofHIF— lct，VEGF，HO·1andMMP-2inthecellcloneswithknock—downHIF—l gene，controlcelisandthecellstreatedwith100 m cobaltcMofide．Cellcyclewasdeterminedbyflowcytometry．Results AlloftheexpressionlevelsofHIF—let，VEGF， HO一1andMMP一2incellgroupswithHIF一1 genesilencingweresignificantlylowerthanthoseincontrolgroupsfP 0．05)．FCM showedthatHIF一1dinhibitioncausedanarrestofthecellcycleatGl／G0phase．Conclusions TheVEGF， HO一1nadMMP-2genesarepositivelycorrelatedwithHIF一10【inesophageal squamouscancercel1．Thebiologicalbehaviour ofangiogenesis，metaptosis，invasionandstressprotectioninesophagealsquamouscancercellcouldbesuppressedbyHIF一 1 genesilencing． Keywords：esophageal squamouscancer；RNA interference；hypoxiainduciblefactor1alpha；v