葛根素提取分离研究.pdfVIP

{：中兽医学杂志)2008年增刊 IgG主要由脾脏、淋巴结中的浆细胞合成和分泌的，IgG是血清中最主要的抗体成分，IgG具有激 活补体、调理吞噬、抗俸依赣的细胞介导的缅臆毒作用(ADCC)以及结合葡萄球菌轰蛋自 (SPA)等作用，因此，IgG在机体免疫防护中起重要作用，是体液免疫能力的标志物pJ。 自细胞与单核一麟噬缅脆系统细胞具有强大的吞噬能力，是参与机体非持异性免疫酶重要 部分，并能参与机体的特异性免疫。其功能提高主要是通过增加吞噬细胞数量和增强其吞噬能 力来实现的(4]。利用颗粒状异物廓清试验，可测定主体动物吞噬细胞的吞噬功能。本研究结 暴表明，实验组的鸡基噬缨腿吞噬功能增强，其吞噬指数与对照组棚比有显著的差异(P0。 05)，提示生精散可以提高机体的非特异性免疫能力。 参考文献：(略) 葛根素的提取分离研究 崔颖’，梁剜平1．郭延生2 (1。中毽农业科学院兰赠富牧岛兽药研究绣农照部磁兽药工霰重点舞放实验囊， 甘赣兰燃730050；2。甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州730070) lobata)中含量较离Ⅲ。野葛 葛根索(Puerarin)存在予豆科葛羼植物孛，在野葛根(Pueraria 根在我国分布广泛，是中医临床常用的祛风解表药。现代药理研究表明，其具有降低血管阻力， 改善心、脑盘滚德环，减浸，§率，降惩心虢耗氧量等佟孀。野葛根孛主要含有大要贰、大豆栽元、 葛根素等多种异黄酮类化台物。葛根索已作为原料药在临床上广泛用于治疗心绞痛，高血压， 心梗和视网膜阻塞等心脑斑管痰病。近年来有羿黄酮类纯舍物用于畜牧她的掇遂疆≯j，研究发 现，异黄酮类物质在动物体内，能显著地促进动物生长，减少腹脂沉积，改善繁殖泌乳性能，提高 免疫力。目前，关于葛根中提取分离葛根素的研究报道较多p。】，但均有不完善之处，笔者根据 葛摄素的理化特性，磷究、辩选出一套成本低，操作篱单，易予工业化生产的提取、分离、纯化工 艺路线，所得产品经熔点、薄层色谱、红外光谱和核磁共振氯谱分析鉴定，其纯度较高．经紫外分 光光度计测定，葛程素的含量为97％，产率为1。41％。 l实验材料 仪器设备 紫外一可觅分光光度计(HITACHI 220—50，美匡DELL 557)，蕴矫分光光度计(HITACHI 400 公司)，核磁共振分折仪MERCURYBBP，美国)，旋转蒸发仪(RE120)，熔点仪。 1．2药品试剂 努葛梭(赡囊兰州撵慈制药厂，产她陕西)，葛根索标准品(中国药品生物制品检定所)，薄 层层析硅胶C(青盘簿洋化工有限公司)，乙醇、酸性三氧化二铝、氯仿、甲醇、正丁醇均为分析 缝；羧甲基纤维素铸(CMC)。 2实验方法 标准滚液的制备 ， 精密称取葛根素标准品5mg于25mL容熊瓶中，加入95％乙醇使溶解并定容，冷藏保存，备用。 薄层色谱条件 取适爨薄层层析硅胶G，加入0．5％的CMC溶液(1：4)搅拌均匀，制备薄层板，自然晾干 后，105。C滔化l}l，置于燥器孛备耀。展牙勰力氯仿一甲醇(4：1)。 薄层色谱分析 在葛校总黄酮的提取过程中和葛根素的每一步分离纯化中，都用薄屡层析法(TLC)进行跟 踪检查，具体方法为：将标准溶液和样品溶液点子同一块薄层板上，用展开剂展开后置紫外灯下 观察，葛根索显蓝色荧光斑点，Rf值为0．31。 葛根总黄酮的提取 称取干燥野葛根饮片20009于3颈圆底烧瓶中，一个瓶口连接空气冷凝管，一个瓶口插入 温度计。加入95％乙醇2000mL，58一秘℃水浴温浸29h，过滤，滤液备援，滤渣巾再次加入 1000mL 95％乙醇，同样条件下进行第二次温浸，过滤，取少量滤液作TLC检态，结果发现仍有 《中兽医学杂志)2008年增刊 葛根素，因此，重复以上操作，至第七次时，T【￡结果显示滤渣中已无葛根索。将前8次滤液合 并，在旋转蒸发仪上减压浓缩为浸膏。 葛根索的分离与纯化 25