磁性固定化胰蛋白酶水解乳清蛋白及清除DPPH研究.pdfVIP

Illchinadairy．net 中国乳品工业 rpgy(chinajournalnet．CD dailyINDUSTRY 磁性固定化胰蛋白酶水解乳清蛋白及清除DPPH研究 徐英操，冯志彪 (东北农业 大学 理 学 院，哈 尔滨 ，150030) 摘 要：利用氨基化磁性高分子固定化胰蛋 白酶对乳清浓缩蛋 白进行水解优化 ，得出水解条件为：底物质量浓度8Og／L，E／S．4；j1400U／g (底物)，tJHh~_为7．0，温度5OoC，水解时间4h。并且对不 同水解度水解产物的清除DPPH能力进行研究，得 出当水解度10％左右清除 I)PPH~g力最大 关键词 ：固定化酶 ；磁性高分子 ；浓缩乳清蛋 白；DPPH 中图分类号：TQ464．7 文献标识码：A 文章编号：1001～223012008)11—0014—03 Research onwhey protein concentratehydrolysiswith im m obilized trypsin used m agneticpolym erandscavengingactivity onDPPH XU Ying—cao．FENG Zhi—biao (DepartmentofChemistry，CoHegeofScience，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin，Heilongjiang，150030) Abstract：Thispaperisaboutresearchofhydrolysisofwheyproteinconcentrate(WPC)withmagneticpolymerimmobilizedtrypsin．Wegot conclusionthattheoptimum conditionsweresubstrateconcentration80g／L，E／S1400U／g(substrate)，pH 7．0，at50℃ for4h，Wealsostud— iedscavengingactivityofdifferentDH ofW PC—hydrolysateonDPPH． Keywords：ilrmmbilizedenzyme；magneticpolymer；wheyproteinconcentrate；DPPH 0 引 言 1 材料 与 方 法 磁性 高分 子微球 即具 有 高分 子微 粒 的特性 ，可 通 1．1 试 剂 与仪 器 过共 聚 、表 面修 饰 等 手段 赋 予表 面 多种 功 能 性 基 团 胰蛋 白酶 (Amresco)，N一(一氨 乙基 )-T-氨 丙基 (如 ：一COOH ，一oH，一NH2)，又具有超 顺磁 性 ，在外 加 三 乙氧基 硅烷 ，酪 氨酸 ，浓 缩 乳 清蛋 白(wpc)，福 林 一 磁场 的作 用下 显示 出磁 性 ，当没 有磁 场 时磁性 消失 。 酚试 剂 (自配 )，水 合 茚三 酮 ，PEG4000，可 见紫外 分 光 因此磁性 高分 子微 球在 细胞分 离 、免疫测 定 、DNA4~v 光 度 计 (SP-755PC)，恒 温 振 荡 仪 ，冷 冻 f燥 机 (FDU- 离 与核 酸杂 交 、生 物 导 弹 、固定 化 酶 等领 域得 到 广 泛 1100)，其 余试剂 均市售分 析纯 。 应 用 。 1．2 水 解样 品蛋 白质质 量浓 度测定 二 苯代苦 味肼 基 自由基 (DPPH)是 一种很 稳定 的 水 解 样 品 蛋 白质 质 量 浓 度 测 定 采 用 folin一酚 ／ 以氮 为 中心 的 自由基 ，在517nm附近有 强 的吸 收 ，其 Lowry法 _引。取一 定体积样 品 ，用水 补体 积到 1mL，加 试 乙醇 溶液呈 现紫色 ，当此单 电子 与其 他 物质提 供 的