无尘室规范.docVIP

目 录 组织培养·········································· 2 增殖培养·········································· 3 各级培养基的制作·································· 4 人员工作责任分配表································ 6 无尘室工作人员调休办法···························· 9 无尘室工作人员奖逞办法·····························10 薪资说明········································10 补充说明········································11 制程与规范 组织培养： 查高产能栽培库的菌谱表，分析得以确认无任何遗传性的病史，采集5棵金针菇； 金针菇的菇伞均匀圆厚、菇杆挺直、菇身纤维直密、菇脚不干缩； 使用10#解剖刀将菇帽顶表面切除，使用刀尖取出菇杆与伞肉之间的子实体，移入PDA培养皿中做菌丝转换培养； 每瓶金针菇组织分离2个细胞培养皿，采集5组共10个组织培养； 放置恒温培养箱中，温控20℃湿度自然； 培养12天后进入各项检测：液态摇瓶培养（纯度分析），目视强度比较，结抗现象交叉比对，显微镜检； 5天后精选出2组织培养的细胞培养皿，分别编号为A组及B组； 将AB两组的液态培养液，增殖于木屑三角瓶中进行着床试验； 20天后菌丝熟成在接入栽培瓶的培养基中进入出菇试验； 26天后成菇采收时将AB两组作产质比对，选出优秀表现的组别再进行另一次的组织培养； 整个流程耗时约65～70天； 增殖培养： 将精选的2组组织培养皿分别的移转到细胞培养皿中； 放置恒温培养箱中，温控20℃湿度自然； 各代种菌谱表编码如下所示： 各级培养基的制作： 一级种PDA制作方法：1000cc水（1公斤）、300g土豆去皮去芽、25g葡萄糖、25g琼脂粉； 制作工序： 细胞培养皿空瓶洗净后，塞入脱脂棉后干热杀菌120℃四小时，冷却备用； 土豆切丁1公分大小煮25分钟，使用1200cc水煮成1000cc；（土豆吸收及水的蒸发量为200g） 经纱布过滤后取汁，加入葡萄糖25g、琼脂25g，煮沸关火。 注入培养皿中15㏄（厚度约为3㎜），立放灭菌120度25分钟，取出冷却（3天后使用）； 保存环境在恒温培养箱中温度20℃，使用期限15天； 接种（增殖培养或组织培养）后，足三天后采取立放方式培养,第五天筛选第一次，第8天筛选第二次，将走菌速度过快或过慢的淘汰，菌面未形成三圈者淘汰； 走菌条件：恒温20℃,不得放置低温保存； 二级种木屑三角瓶制作方式：纯木屑、米糠、大豆皮、麸皮、水、三角瓶6个； 制作工序： 300ml空瓶洗净后，塞入脱脂棉后干热杀菌120℃四小时，冷却备用；（或使用透气硅胶栓，可免除空热杀菌） 木屑使用网筛过选，去除细粉及过粗的颗粒及杂质； 装填后含瓶重320g含水率63％、，木屑比例78％、米糠比例15％、大豆皮2％、麸皮5％。 装填后打孔，在使用清水洗净四周，塞棉花后包牛皮纸或使用透气硅胶栓封瓶口； 灭菌栽培瓶一同灭菌，完成后放置无尘操作台冷却后接种； 接种后放置养菌室进行驯化培养阶段，温控19℃。 三级种玻璃原种瓶制作方式：纯木屑、米糠、大豆皮、麸皮、水、玻璃瓶44瓶；（A种为主B种备用） 制作工序： 500ml空瓶洗净后，塞入脱脂棉后干热杀菌120℃四小时，冷却备用；（或使用透气硅胶栓，可免除空热杀菌） 木屑使用网筛过选，去除细粉及过粗的颗粒及杂质； 装填后含瓶重630g含水率63％、木屑比例78％、米糠比例15％、大豆皮2％、麸皮5％； 装填后打孔，再使用清水洗净四周，塞棉花后包牛皮纸或使用透气硅胶栓封瓶口； 灭菌栽培瓶一同灭菌，完成后放置菌种冷却室冷却后接种； 接种后放置菌种养菌室进行驯化培养阶段，温控18℃； 四级种菌种瓶制作方式：纯木屑、米糠、大豆皮、麸皮、水、塑料瓶640个／40篮；（每隔3天多做B种40篮以作备用） 制作工序：（可与三级种配方一同制作使用） 1100ml空瓶洗净后倒放备用； 木屑使用网筛过选，去除细粉及过粗的颗粒及杂质； 装填后含瓶重830g含水率63％、木屑比例78％、米糠比例15％、大豆皮2％、麸皮5％； 装填后打孔加菌种专用盖，再使用清水洗净四周； 使用橡皮筋将瓶盖下沿套住； 灭菌栽培瓶一同灭菌，完成后放置菌种冷却室冷却后接种； 接种后放置菌种养菌室进行培养阶段，瓶间温度18℃； 培养期间注意事项：接种后第10天初选一次，如发现异