HPLC-ELSD法测定熟地黄中果糖葡萄糖含量.pdfVIP

HPLC-ELSD法测定熟地黄中果糖葡萄糖含量.pdf

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第十届全国药用植物及植物药学术研讨会 The10mNationalConferenceonMedicinalPlantsand Phytomedicines PP.126 HPLC-ELSD法测定熟地黄中果糖葡萄糖含量 张丽萍,李军,张振凌,王晓阁 河南中医学院,河南郑州,450008 生地炮制成熟地后,其性味、功效发生了改变,其化学成分、药理作用也发生了相应变 化【l’3】,其中单糖含量变化较显著【4】。本研究采用HPLC.ELSD法对熟地中果糖和葡萄糖含量 进行测定,为熟地黄炮制工艺及质量标准研究提供参考依据。 l仪器与材料DIONEXSummit液相色谱仪,Alltech2000ES蒸发光散射检测器;乙腈为色 谱纯;果糖、葡萄糖对照品购自药品生物检定所,其余试剂均为分析纯。 2色谱条件Hypersil 糖特征峰保留时间分别在8min和9min左右。 3果糖、葡萄糖对照品线性试验分别取果糖、葡萄糖对照品1.01mg和O.90rag,精密称定, 置lml量瓶中,加乙腈.水(80:20)至刻度,作为对照品溶液。取果糖、葡萄糖对照品溶液分 1.3326X,r--0.9999, 别进样l,2,3,4,5,6,7,81aL,照上述色谱条件分析,得果糖回归方程Y=30.6132.1 0.90-7.20lag线性良好。 4供试品溶液制备取熟地黄样品,70℃干燥,粉碎(过3号筛)。取粉末2.09,精密称定, 次,每次5mL,滤过,洗涤液与滤液合并,转移至lOOml量瓶中,放置室温,加80%甲醇至 刻度。精密吸取2mL上述溶液于5mL量瓶中,加水至刻度,0.45I.tm微孔滤膜滤过,作为供 试品溶液。 5果糖、葡萄糖加样回收率试验 按上述色谱条件,测定计算果糖平均回收率:98.3l%(n=5), RSD-2.29%;葡萄糖平均回收率:98.65%(n=5),RSD.2.48%。 6供试品含量测定精密吸取4项下中各供试品溶液,按上述色谱条件测定,每个供试品液 进样3次,测定结果见下表。 序号 样品 果糖含量%匍萄糖含量% 序号 样品 果糖含量%葡萄糖含量% l 河南温县清蒸 11.88 9.02 6 河南温县洒炖 13.09 11.Ol 2 河南武陟清蒸 lO.85 lO.25 7 河南武陟酒炖 12.87 10.73 3 山东菏泽清蒸 9.16 7.16 8 山东菏泽酒炖 11.06 8.37 4 山西翼城清蒸 10.73 7.85 9 山西翼城酒炖 10.48 7.73 5 山西临汾清蒸 12.58 9.00 10山西临汾酒炖 12.37 9.37 7讨论 果糖与葡萄糖的出峰时间比较接近,通过筛选不同的流动相及比例,其中乙腈.水 (80:20)作为流动相时,果糖与葡萄糖的色谱峰能够较好分离。本试验对熟地黄的清蒸和酒 炖炮制品中果糖和葡萄糖含量进行了测定,根据测定结果,清蒸、酒炖熟地黄中果糖含量9% 以上,葡萄糖含量7%以上。 基金项目:科技部“十五”科技攻关重大项目(编号:2001BA701A551.22) ·--——194··-——

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