中国荷斯坦牛HSF1与HSBP1基因多态性分析.pdfVIP

132 ofthe12tlINational onAnimalGeneticMarkers Proceeding Symposium 中国荷斯坦牛删和鼠SBPz基因多态性分析 王延久L2，王长法1，鞠志花1，何剑斌2，黄金明1，李建斌1，仲跻峰1，李秋玲卜 (1山东省农业科学院奶牛研究中心，济南250100；2沈阳农业大学畜牧兽医学院，沈阳 100160) 引言 shock 热休克蛋(heatproteins，HSPs)主要作为分子伴侣发挥细胞保护功能，可以促进新 生蛋白形成正常构象和正确定位，有助于减轻应激对细胞的不良影响。热休克蛋白的表达受 shockfactor 热休克转录因子1(heat 1,HSFl)调控。HSFI与热休克基因启动子结合，启动基因 shock 的转录，最终促进HSP的表达。在热休克刺激短时间内，热休克因子结合蛋白l(heat factor bindingprotein，HSBPl)抑制删的转录，推测脚J『在热应激反应中起重要反馈抑制 作用。因此研究HSFl和HSBPl对HSP的调控表达具有重要意义。本研究通过分析中国荷斯 坦牛HSFl和HSBPl基因遗传多态性，以期找到与热应激相关的单核苷酸突变位点，为培育 奶牛耐热品系，解决夏季热应激问题提供理论依据。 材料方法 冻存。常规酚．氯仿抽提法从血样中提取牛基因组DNA。利用DNA测序技术对删和HSBPl 基因进行SNPs位点扫描。测序结果表明在牛脚，基因的第三内含子145I(G／T)位点上存在一 处突变点。通过CRS—PCR和PCR—RFLP技术对这4个SNPs进行基因型分型，所用的限制性内 切酶分别为XbaI、HhaI、RsaI和AluI，分析三个不同种属的牛在HSFl和HSBPl基因上 的多态性。统计基因型，计算基因频率、基因型频率、多态信息含量、群体杂合度、有效等 位基因数及x2检验，进行Hardy。Weinberg平衡检验。 结果 试验结果表明：H铲，基冈SNP的AA基因型频率最高，优势等位基因为A，而HSBPl 为中度多态(0．25PIC0．5)。 讨论 中度多态，说明该位点的遗传变异较大，可提供较多的遗传信息，有较大的选择潜力。的多 态信息含量均高于其他两个品种，均为这表明中国荷斯坦牛群体的遗传多态性较丰富，较适 合作为性状与标记间连锁分析的候选标记。经f适合性检验，在群体中脚J基因1451(G／T) 人工选育中国荷斯坦牛的改良进程中，必须加大人工选择力度，加强优秀种公牛的选育，同 时加快淘汰低抗热应激能力母牛个体的进程，并且加强对我国地方品种的研究，提高我国牛 种质的整体水平，加快国内优良抗热应激品种的选育过程。 基金项目：山东省自然科学基金项目(Y2008D56)，农业部现代农业产业技术体系建设项目(nycytx-10)， E-maih 农业部公益性行业科研专项(nyhyzx07-036)。‘通讯作者李秋玲，liqiulin92000@yahoo．corn．cn