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用于软骨修复的可降解聚合物细胞支架 陈晓东张颖朴东旭 中国康复研究中心康复医学研究所北京 100077 Tel：0106809Fax：010 胡怀建 北京宣武医院骨科北京 100053 摘要本研究利用聚DL．乳酸制各，多孔细胞支架用于软骨修复的组织工程研究。体外细胞培养和动物植 入实验获得很好结果，表明聚乳酸支架用于修复软骨组织损伤有良好的应用前景。 关键词聚DL．乳酸软骨组织工程 1 引 言 软骨组织损伤是危害较为严重的疾患，关节软骨再生能力有限，受损后修复困难。传统 的白体软骨移植或人工关节植入还不能取得十分满意的效果。近年来，利用组织J二程思想进 行软骨修复的探索逐渐开展起来，已经取得了许多令人鼓舞的结果【11。组织工程方法修复软 骨的基本思路是将健康软骨细胞接种在可降解的细胞支架上，进行体外培养，细胞增殖后移 植到受损软骨处，植入细胞与周围缅织融合形成新的软骨组织，同时聚合物支架逐渐降解， 最终完成对缺损的修复。 由可降解聚合物制成的支架在上述过程中起着重要作用。细胞只有在支架上进行培养才 能形成具有三维立体空间结构的组织，利用支架进行移植能提高移植组织的成活率，手术操 作也容易进行。目前较为常用的材料是聚乳酸，是近年来研究较活跃的可降解商分子材料， 其安全性，降解特性都己得到较多的研究。聚乳酸包括聚左旋乳酸和聚混旋乳酸(聚DL乳 酸)，制备支架常用利用聚DL乳酸。聚乳酸制备细胞支架具备如下优点：生物相容’|生好， 降解性质可以调整，易于加工成形。本工作研究了利用聚DL乳酸制备细胞支架用于软骨细 胞修复。 2材料及多孔体支架制各 所用材料为实验室合成的聚DL．乳酸。合成步骤口J包括由乳酸制备丙交酯，纯化丙交酯， 聚合，聚合物提纯等。得到聚合物分子量7万(粘度法．溶剂三氯甲烷)。多孔体支架采用溶 盐法制备f。聚DL．乳酸经提纯干燥后，溶于三氯甲烷，制成溶液，加入不同重量的氯化钠(化 学纯)细粉，所用细粉为分样筛筛分后粒径180．280微米的部分。溶液与盐均匀混合后自然 挥发．再经真空干燥得到圈态复台物。将复合物在蒸馏水中浸泡．并反复更换洗去氯化钠， 最后得到薄膜状白色多孔体。 制得的多孔体用光学显微镜观察，表明为连续的多孔体，见图1。通过测量体积称重可 计算其空隙率。计算公式为： 1一表观比重／固体聚乳酸比重 计算表明多孔体的空隙率在80％至93％之间，根据溶液量与盐的比例不同而变化。加入盐越 多，空隙率越大。 3 细胞培养与动物植入实验 取新生幼兔软骨，经粉碎、酶消化、洗涤得到软骨细胞。将细胞以一定浓度与制得的高 797 分子支架在培养液中共同培养，待细胞培养一定时间后，将载有细胞的支架一致到兔的膝关 节软骨处(预先人为造成损伤)，术后一定时间处取出移植处软骨组织进行检测。共实验12 只兔子。 实验表明软骨细胞体外培养时可以在支架中很好地生长，并分泌细胞基质。植入兔膝关 节后六个月植入细胞基本与宿主周围软骨组织融合，组织学检测表明植入软骨细胞存活，呈 柬状排列。植入的高分子支架在一、二月时仍可见，在第三个月时基本消失。作为对照，在 软骨损伤处单纯植入聚DL乳酸细胞支架则不能达到良好的修复效果。见图2。在体外进行 的聚乳酸降解实验显示，在水浸条件下，聚DL乳酸膜的降解速度要小于体内植入聚DL乳 酸支架的降解速度，这可能与所处环境和聚乳酸形态不同有关，需做进一步研究。 图1 多孔体的微观结构 国2植入后的软骨组织 4结 论 通过软骨细胞培养和动物植入实验表明，用DL．聚乳酸制各的多孔体可以作为软骨