溶质在反相液相色谱中动力学色谱规律.pdfVIP

西北大学学报(自然科学版) 么 20lO年6月，第40卷专辑，J皿．，20lO，V01．40，S．I． ·研究快报· Joumalof№rthw∞t Sci∞ce t， Unive玛畸(NatIlralEdition) r JNwu 溶质在反相液相色谱中的动力学色谱规律 李建军1j刘 鹏2，耿信笃3 (I．西北大学化学与材料科学学院，陕西西安710061；2．西安蓝晓科技有限公司，陕西西安71006l； 3．西北大学现代分离科学研究所，陕西西安710069) 摘要：目的以小分子溶质、多肽和大分子蛋白质为对象，研究溶质在反相液相色谱中的动力学。 方法采用反相高效液相色谱研究了它们在不同流动相流速条件下的分离情况以及它们在动力学 因素改变下的色谱行为，并得到了相应的动力学色谱规律。结果 四种小分子溶质和四种蛋白质 在流速依次增大时，各溶质的保留值均减小，然而其分离情况却大不相同。不同流速时，其峰容量、 分离度和出峰顺序也不尽相同。若对上述8种溶质的艘r和流动相流速秒的双对数作图，可得到 由相关系数可以看出此8种溶质的log(冗冠r)与log 一线性方程log(艘丁)=口+6109(t，)。结论 (t，)之间存在着良好的线性关系。 关键词：动力学色谱；反相色谱；流速；分离度 文献标识码：A 文章编号：1000-274X(20lO)03旬237旬2 中图分类号：0657．7+2 流动相流速向来是色谱分流中重要的一个因 素。Boyes等在1988年依据动力学原理提出的一种 新的色谱方法，称之为障碍色谱(slal咖chmlmtog随一 一 g = t phy，SC)用于分离DNA分子…。这种方法最大的 n N 特点就是对溶质的分离是依靠流体力学现象，而非 U U 暑 热力学中的溶质在固定相和流动相之间的分配平 一 o o ∞ 衡。目前有关sC的研究多集中在分离机理及影响 - 《 因素的研究，用于分离的样品仅限于少量标准DNA 分子，很少有用于实际样品的研究。另一种动力学 分离模式流体动力学色谱(hydrodyn锄icch删抛tog- J。在HDC r印hy，HDC)表现出了相同的特点瞄_4 f，mIn 中，其溶质洗脱顺序和sEC洗脱顺序相同，然而它 却与sc相反，其原因在于低流速下的大分子在靠 图1 4种小分子和4种整体蛋白在不同流速下的反相 近固定相表面的排阻效应。由此看出，上述两种动 色谱图 色谱峰：l：苯丁醇；2：苯戊醇；3：萘；4：联苯；5：核糖核酸 力学色谱中流动相流速是溶质实现分离的关键因