RP-HPLC法测定脑得生片中羟基红花黄色素A的含量.pdfVIP

维普资讯 第23卷第6期 广 东 药 学 院 学 报 Vo1．23No．6 2007年 12月 JOURNALOFGUANGD0NGCOLLEGEOFPHARMACY Dee．2007 RP．HPLC法测定脑得生片中羟基红花黄色素 A的含量 王俊永，梁生旺，南海军 (广东药学院 中药学院，广东广州510006) 摘要：目的 采用反相高效液相色谱法建立了测定脑得生片中羟基红花黄色素A含量的方法。方法 采用超声波法提取，经大 孔树脂HP20纯化后 ，以反相高效液相色谱法测定羟基红花黄色素A的含量。色谱柱为PhenomenexLunaC。(5txm，3．9mm ×150mm)，流动相为甲醇一乙腈_o．7％磷酸溶液 (体积 比21：5：74)，流速 1．0mL·min～，柱温30℃，检测波长403am。结果 羟基红花黄色素A在 1．22—9．15~Ig／mL范围内线性关系良好，相关系数为0．9998。平均加样回收率为 100．93％，RSD为 1．73％。结论 该方法准确、专属性强、重复性好，可用于测定脑得生片中羟基红花黄色素A的含量。 关键词：脑得生片；羟基红花黄色素A；含量测定；大孔树脂 中图分类号：R284．1 文献标识码：A 文章编号：1006—8783(2007)06—0650—02 脑得生片由三七、川芎 、红花、葛根和山楂等组 2 方法与结果 成 ，具有活血化瘀 、疏通经络、醒脑开窍之功效 。 2005年版 《中国药典》仅以三七皂苷为定量指标对 2．1 色谱条件与系统适用性试验 脑得生片进行质量控制 J。而红花作为该药的重 PhenomenexLunaCl8(5 m，3．9mm×150mm) 要组成部分之一，其主要有效成分羟基红花黄色素 色谱柱；流动相为甲醇一乙腈_)《．7％磷酸(体积 比21： A (hydroxyls~floryellowA，HSYA)具有扩张冠状 5：74)；检测波长为403nm；流速为 1．0mL·min～； 动脉、缓解心肌缺血和抗凝血、抑制血栓形成等作 柱温为30℃。理论塔板数以羟基红花黄色素 A计 用 ，引，在脑得生片治疗脑血管疾病方面起重要作 算不低于3000；分离度大于 1．5；重复性 RSD为 1． 用。 目前 ，关于脑得生片中红花成分 的质量控制方 58％；羟基红花黄色素 A峰的拖尾因子为 1．03。色 法研究尚未见报道。本文建立了测定脑得生片中 谱 图见图1。 HSYA含量的RP．HPLC法 ，为进一步有效控制脑得 生片的质量提供了实验依据。 1 仪器与试药 1．1 仪器 Waters2695型高效液相色谱仪 ；Waters2996二 极管阵列检测器；WatersEmpower色谱工作站；KQ． 100超声波清洗器 (100W，昆山市超声仪器有限公 司)；RE52CS旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器厂)。 1．2 试药 0 8 l6 甲醇和乙腈为色谱纯，屈臣氏双蒸水，其他试剂 t／mln 均分析纯；HP20型大孔树脂 (Diaion，日本三菱化学 图1 羟基红花黄色素A对照品(A)，阴性对照 (B)，供试 公司)；羟基红花黄色素 A(批号 ：111637—200502 样 品(C)色谱图 中国药品生物制品检定所)；脑得生片 (规格：3g／ Fig．1 HPLCchronmtogramsofreferencesubstance(A)， 片 ，批号分别为 20070312广