卵菌无毒基因地研究进展.pdfVIP

卵菌无毒基因的研究进展 董莎萌，郑小波，王源超 (wangyc@njau．edu．cn) (南京农业大学植物病理系，南京210095) 卵菌是一类重要的植物病原菌，可给农业生产和生态环境带来毁灭性破坏，但是卵菌特殊 的致病致病机理却研究甚少。卵菌和寄主植物的互作模式符合基因对基因学说，而且生产实践表 明栽种抗病品种是控制许多卵菌病害的有效措施，因此对卵菌的无毒基因开展研究具有理论和实 et et et et 和Avr4／6等(Riechmanna1．，2000；Allena1．，2004；Shan a1．，2005)。分析 a1．。2004；Armstrong 发现这些无毒基因具有类似的结构特征：具有保守的N端信号肽着DRXLR定位序列，C端虽然序列 变异大但也存在着保守域WH／L等。此外无毒基因在基因组结构和转录特征上也有规律可循。随 着卵菌的研究走入后基因组时代，充分发掘生物信息学潜力并将之和遗传学、分子生物学等技术 联系已经为克隆卵菌无毒基因的工作打开了突破口。卵菌无毒基因的毒性功能也一直是科学家关 注的焦点，zigzag理论和多种植物瞬时转化技术为研究卵菌无毒基因的毒性功能也提供了理论和 技术上的支持。研究表明无毒基因具有抑制包括细胞壁纤维素沉积，活性氧爆发以及细胞过敏性 死亡等在内的多种植物免疫反应。总之，新策略和新技术的应用将为无毒基因相关研究提供快速 发展的机遇。 无毒基因是卵菌和寄主互作过程中分泌的众多效应因子中的一类重要蛋白，卵菌病害的发 生符合基因对基因假说，所以无毒基因与寄主的相互作用决定着卵菌病害的发生。目前已经克隆 的卵菌无毒基因如下： 1．HpATRl姚B ATRlⅣdwsB是基于图位克隆得到的一个单显性控制基因，该基因在H parasitica菌株Emoy2 别，也能够被刚)PJ—WsB所识别。用粒子轰击法在拟南芥细胞质内中瞬时表达A7RJ删w姐能够引 发细胞死亡的发生。A豫JM哪在不同的H parasitica菌株中具有高水平的多态性。从8个菌株 获得的6个等位基因中，将近1／3的氨基酸序列具有多态性变化。各种选择压力以及有性重组是 其进化的因素。尽管该蛋白包含有保守的信号肽及RXLR．motif，并且表现出一些无义突变，．但 是蛋白的剩余部分仍处于正向的选择压力之下，表明其C末端区域参与了与植物R基因的协同进 et 基因，并且对大多数菌株表现出一个广谱的抗性(Rehmanya1．。2005)。 2．HpATRl3 Bittner-Eddy等鉴定了且parasitica的一个基因Ppatl7，该基因在Hparasitica侵染拟南芥时上 et 调表达。基于共分离和活体表达试验最有证明该基因为无毒基因ATRl3(AIIena1．。2004)。ATRl3 35 编码一个187aa蛋白，在拟南芥中用基因枪转化瞬时表达及转基因植株的诱导表达该蛋白触发依 头的由7个氨基酸构成的重复基序，在其93位和136位之间存在一正向重复区域，该区域由4个重 复构成，每个重复包含有11个氨基酸残基，四个重复之间的氨基酸序列不尽相同。与其对应的抗 病基因尺尸PJ『3类似，ATRl3显示出极端水平的序列多态性证明了选择压力的多样化。在鼠 llaa重复单位但仍能诱导依赖于Rppl3的HR反应。和A豫卜一样，有性重组以及贯穿整个编码区的 不均匀的突变氨基酸分布表明该效应蛋白的活性区域在其C末端(Allenetal．，2004)。 3．PiAvr3a 利用候选效应分子的多态性相关分析得到对应于马铃薯R基因的P infestans