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第四届环境模拟与污染控制学术研讨会论文集
被动式采样器与原位鱼体暴露用于监测水体Ah蔓舔聂面丽瓦雨两丙
柯润辉,王子健,李剑,乔敏,许宜平
(中国科学院生态环境研究中心环境水质学实验室,北京,100085)
课题背景:863项目“太湖水源地水质改善技术”子专题“有毒物质监测和生态健康风
险评价
被动式采样器SPMD模拟了水生生物富集水中疏水性有机污染物的过程,并可用于
确定生物有效态污染物的长期平均浓度。先前的研究已经证明太湖梅梁湾地区沉积物的
Ah受体效应主要是由多环芳烃(PAH)类物质造成的,因此本工作以多环芳烃类物质
为研究对象,测定了SPMD透析液中的多环芳烃物质的浓度,并同时用H4IIE鼠肝癌
细胞系测试该透析液的Ah受体效应,另外,结合常规的鱼体现场暴露实验的结果,来
评估SPMD与离体生物测试相结合的方法用于监测水体Ah受体效应的可行性。
研究方法:
1.实验设计
太湖梅梁湾面积约129.3
krn2,平均水深约2m,是无锡市的主要水源地,同时又承
纳了来自无锡与常州的部分污水,近年来水质不断恶化,先前的研究表明该地区的水体
和沉积物中有恒定浓度的多环芳烃类物质检出。本实验在该区域选取5个具有代表性的
点位,实验时间为2004年6月14日至7月17日。
实验所选择的受试生物物种为在我国分布广泛的鲫鱼,实验用鲫鱼购自中国水产科
学院淡水鱼研究中心(无锡),其实验背景良好,鱼的体形大小基本一致,平均体长约
20
cm,平均体重约180
g。
被动式采样器SPMD为自己制作,具体操作见文献【l】。
先将实验用鲫鱼在清洁的水体中放养7天,期间不投加饲料,然后将其放在充氧的
容器中运至实验地点。在每个点位打一个木桩,然后往湖水中放置一个边长为1m的立
方体不锈钢丝笼,将笼子固定在木桩上,在其中的一个点的笼子中放入25尾鲫鱼,同时
天采集样品,其余四个点则只采集第32天的样品。在实验过程中没有人为投加饲料,实
验装置均固定在水面下约lm处。实验期间平均水温为3l℃。采集的样品包括SPMD样、
鱼的活体肝脏样和鱼体肌肉样,肝脏样置于液氮中(.80℃)保存,SPMD和鱼样密封
后保存在低温冰箱中(约5℃)带回实验室进行处理。
将SPMD外表面擦净风干后用索提过的剪刀剪成碎条,放入500ml锥形瓶中,加
入200
ml正己烷振荡24h(18℃),然后置换成新200ml正己烷,再振荡24h(避光),
合并浓缩后待处理。
取一定量的鲫鱼肌肉组织,剔去鱼鳞后将其切碎并匀浆,在研钵中与无水硫酸钠均
匀混合,研成千粉末。然后加入回收率指示物,放入索氏提取仪里,用正己烷/丙酮=50:50
(V/V)提取48h,提取液用于测定脂含量和化学分析。
6890/5973Network型气相色谱.质谱仪来测定多环芳烃类物质的浓
用美国Agilem
度,通过检索NIST质谱谱库和色谱峰保留时间进行定性分析,并采用内标峰面积法、5
点校正曲线定量。
将液氮中冰冻保存的鱼肝脏样品化冻后,进行EROD酶活力测定和蛋白质含量测定,
测定方法参考Phol等人121报道的快速终止荧光光度法的方法原理并根据实验室条件进行
了改进。
用H4IIE鼠肝癌细胞系对SPMD萃取液进行Ah受体效应测试的方法参见文献【3j。
2.结果与讨论
32天的SPMD富集动力学实验结果表明,随着富集时间的增加,SPMD萃取液的
24l
第四届环境模拟与污染控制学术研讨会论文集
lb)。结果表明,SPMD能有效的富集水中的具有Ah受体效应的物质,并且是一种灵敏
的采样方法。
32天的原位鱼体暴露实验结果表明,在暴露16天后,鱼肝脏的Ah受体效应与未
体在长期暴露中所产生的环境适应性及其它的因素所造成。
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