蠲痛饮对大鼠子宫内膜异位症微血管密度实验研究.pdfVIP

世界中医药学会联合会妇科专业委员会第四届中医妇科国际学术大会论文集 蠲痛饮对大鼠子宫内膜异位症微血管密度的实验研究 李卫红1，李莉。，谭文举2 l广西中医学院附属瑞康医院，南宁 530000； 2广西中医学院2009级研究生，南宁530001 为良性病变，但它的某些生物学行为却与恶性肿瘤类似，最显著的特征是具有组织侵袭和血管生成 s病灶局部血管生成就 的能力。近年来大量研究表明血管生成是EMs发生发展的重要环节，抑制EM 成为目前研究关注的热点之一。本实验以子宫内膜异位症模型大鼠作为实验对象，观察蠲痛饮对其 异位内膜血管形成是否具有抑制作用。 1材料与方法 广谣医科大学实验动物中心提供。合格证号：SCXK桂2003—0003。常规饲养。 1．2 VItraSensitiveTM Olympus。CX21普通光学显微镜。 1．3实验药物：蠲痛饮主要由鸡血藤、丹参、当归、川芎、赤勺、补骨脂、白术、土茯苓、泽 兰、龙血竭、田七、炙甘草组成。购于广西中医学院附属瑞康医院，按原方药物比例水煎浓缩，配 制成含生药量1．33 g／mL混悬液，放于40C冰箱保存，剂量按动物与人临床用药剂量换算公式算出。丹 广西中医学院药物制剂教研室惠赠。微血管染色用兔抗鼠CD31多克隆抗体和sP免疫组化染色试剂 盒均购自武汉博士德生物工程有限公司。DAB显色剂购自武汉博士德生物工程有限公司。 OLYMPUS．CX2 1普通光学显微镜。 1．4动物模型建立、分组及给药：动物模型建立、分组：雌性Wistar大鼠60只，随机抽取10只 作为正常组，其余50只随机分为蠲痛饮高、中、低剂量组、丹那唑组、模型组对照组5组进行子宫内 膜异位症造模。造模大鼠适应性饲养l周后，连续5日行阴道脱落细胞学检查，择动情期行造模术， 采用大鼠自体内膜子宫内膜异位症造模方法，造模方法参照参考Jones方、法【¨。造膜4周末，空白组及 造模大鼠各随机取6只做相关检测(以移植物有血管形成，积液高度2mm，送检证实内膜成活作为 模型成功的标准)证实子宫内膜异位症形成。 给药：造模4周开始给药，剂量按动物与人临床用药剂量换算公式算出，其中蠲痛饮高、中、 胃，模型组及空白组按照Iml／1009·d给予生理盐水，1次／d，连续灌胃4周。 1．5动物实验指标的检测：sP法检测在位及异位内膜组织微血管密度和异位组织体积测量。． 世界中医药学会联合会妇科专业委员会第四届中医妇科国际学术大会论文集 露异位组织，游标卡尺测量组织体积大小：取下在位及异位内膜置于10％qi醛溶液中固定，常规石 蜡包埋，4um厚度连续切片，进行HE染色和免疫组化染色。 量最丰富的区域，在200倍视野下计数5个视野的微血管数目，以任何一个棕色染色的单个内皮细胞 或内皮细胞簇作为一个血管计数，然后求平均值。凡管腔8个红细胞大小、炎症、肉芽、坏死区、 带有较厚肌层的血管及静脉窦均不计数。 1．6统计学处理：所有数据用SPSS 13．0软件进行统计分析，单因素方差计量资料结果以均值4- 标准差(i土s)表示，组间差异比较采用双侧t检验。 2结果 2．1 一般情况：用药前后各组大鼠精神均可，活动正常，饮食及体重均无明显改变。 2．2蠲痛饮对大鼠异位组织体积大小的影响：用药后，丹那唑组和不同剂量蠲痛饮组较模型组 体积有不同程度的减小，比较有显著性的差异(P0．05)。说明丹那唑组和不同剂量蠲痛饮均可以 抑制异位子宫内膜的发展。丹那唑组和蠲痛饮高剂量组组间比较有显著性差异(P0．05)，表明蠲 痛饮高剂量较丹那唑缩小EMS大鼠异位组织体积效果好。结果见表1。 表1 蠲痛饮对大鼠异位组织体积的影响(i姆) 注：与模型组相比，幸P0．05；与丹那唑相比，AP0．05 2．3蠲痛饮大鼠在位及异位内膜MVD的影响：模型组异位内膜的MVD要高于在位内膜：模型 组在位内膜MVD较正常组高，但无统计学意义(P0．05)：用药后，丹那唑组和不同剂量蠲痛饮组 异位内膜较模型组MVD均有下降，比较有显著性的差异(P0．05)：高剂量蠲痛饮组较丹那唑组异 位内膜MVD下降明显，比较有显著性的差异(P0．