利湿解毒扶正为主逆转肝纤维化动物实验研究.pdfVIP

中医药学术发展大会论文集 利湿解毒扶正为主逆转肝纤维化的动物实验研究 何金洋 符林春 周映云 周兰芳 广州中医药大学热带医学研究所 广州 510405 肝纤维化(Liver Fibrosis，峦)是所有慢性肝病发展至肝硬化(Liver 实，LF及早期LC可以被逆转。因此，对于如何逆转LF及Lc的研究具有重要意义。近年研究表明，中医药 在治疗U’方面具有一定优势，有些中药复方已经过大规模临床试验证实具有抗LF效果。这些中药复方均 以活血化瘀扶正或软坚散结为主，部分药物已成为目前治疗肝纤维化的临床常用药物。 Bvirus，HBV)感染引起，以中医的角度观察，即认为LF及 我国的LF和LC主要由乙肝病毒(Hepatitis Lc者大多有湿热毒邪的存在。依据中医整体观念，治疗LF应该顾及其湿热毒邪的存在。而目前的治疗 LF药物大多以活血化瘀扶正为主或以软坚散结为主，并未顾及湿热毒邪的存在，因此推测这些药物并无 清除湿热毒邪作用，因此可能并没有抗病毒作用。而实际上也未见这些药物有抗HBV作用的研究报告。 一问题，我们设计了以利湿解毒扶正为主，配合活血化瘀法治疗LF的新思路，在前期研究“复方肝毒清” 抗HBV及护肝作用的基础上，以白花蛇舌草、山药、旱莲草、益母草等为主的8味中药组成复方——逆纤 解毒方，并进行了逆纤解毒方逆转LF的动物试验研究。 1材料与方法 1．1 实验动物 0008215。喂养于广州中医药大学实验动物中心清洁级动物房；按照中国实验动物学会规定的大鼠喂饲 标准进行喂养。 1．2药物及主要试剂、仪器 逆纤解毒方中各药物组分均购自“广州采芝林药业连锁店”，按比例混合后，用蒸馏水提取2次，每次 光栅分光光度计由上海第三分析仪器厂生产。 1．3造模及分组给药 大鼠适应性喂养3天，对80只大鼠进行造模，其余10只为空白对照组。造模方法为：用生理盐水配 制1：100(V／V)的DMN稀释溶液，每周前3天对大鼠进行腹腔注射，剂量为10／1L DMN／Kg体重；空白对照 组同时腹腔注射生理盐水；共注射4周。第四周注射结束后随机取10只造模大鼠取血和肝脏保存待检 (标本采集方法如下述，该组命名为模型对照1组)；并同时开始分组给药；将其余经过造模的大鼠等分为 模型对照组2组、秋水仙碱组、逆纤解毒方高剂量组、逆纤解毒方中剂量组及逆纤解毒方低剂量组；秋水 对照2组及空白对照组均灌胃生理盐水lOml／kg。均每天灌胃，共灌胃18天。从开始造模到试验结束观 察记录动物死亡情况。实验结束时摘眼球取血收集血清，观察腹水情况、肝脏肉眼观形态、色泽；并取左 前叶肝脏，部分置于bouin固定液中固定，剩余部分一70。C冷冻保存待检。 736 中医药学术发展大会论文集 1．4血清ALT与肝组织Hyp检测 ALT检测采用赖氏法，Hyp检测采用样本碱水解法；分别严格按照试剂盒操作说明书进行操作。 1．5病理检查 固定36h后取出选块、石蜡包埋、切片5,u．m，然后行苏木素一伊gI(HE)染色，光镜下观察并拍照。 2结果 2．1 大鼠死亡、腹水及肝脏肉眼观情况 造模第一周死亡2只，第2周未见死亡，至第三周注射完毕后开始有大鼠批量死亡，至第四周造模结 束时造模大鼠共死亡14只，仍有66只存活，处死10只作为模型1组后，分组给药时模型2组12只，秋水 仙碱组、逆纤解毒方高、中、低剂量组均为11只。在给药期间仍陆续有大鼠死亡，至给药结束采集标本时 模型2组为10只，秋水仙碱组为8只，逆纤解毒方高剂量组为9只，中剂量组为8只，低剂量组为6只。 取肝脏时见模型对照1组中6只有大量腹水，2只少量腹水，其中4只为血性腹水，有腹水者肝脏均 呈黑褐色，肝均较正常组肿大。模型对照2组取材时见有8只有大量腹水，均为血性，另2只少量腹水； 肝脏均为黑褐色，有2只肝脏总体积缩小，但边缘均不锐利，其余肝脏均肿大；秋水仙碱组2只有腹水，且 这2只肝脏均为黑褐色肿大肝脏；其余6只未见腹水，但肝脏均肿大，颜色为浅黄，与空白对照组接近，但 仍能看出肝脏表面有较多颗粒样；逆纤解毒方高剂量组有1只见少量腹水，但肝脏色泽均为与空白对照 组接近的浅黄色，且肝脏均稍微肿大，5只边