医用生物蛋白胶携载反义寡核苷酸的实验研究.pdfVIP

第 二 军 医 大 学 学 报 ； （） · · 2001 Jun 22 6 598 Acad J Sec Mil Med Univ ·技术和方法· 医用生物蛋白胶携载反义寡核苷酸的实验研究 曲乐丰，景在平，曹贵松，仲剑平 （第二军医大学长海医院血管外科，上海 200433） ［关键词］ 医用生物蛋白胶；寡核苷酸，反义；血管内膜增生 ［中图分类号］ ［文献标识码］ ［文章编号］ （ ） R 654 .4 B 0258-879X 2001 06-0598-02 ! 血管内膜增生是各类血管手术后造成中远期通畅率较 合后即刻发生凝结，整个过程约 ， 明显强化，凝胶 10 S 35 min 差的一个主要原因，临床上应用抗增生药物防治，但效果不 块变得更致密。镜下见凝胶表面呈膜状，内部呈丝状蛋白结 理想。反义寡核苷酸防治血管内膜增生有良好前景，在反义 构，其间充满颗粒状液体。震动试管，凝胶表面有少量液体 基因防治内膜增生的研究中，血管外膜给药已成为一紧密结 释出。轻压试管，凝胶具有弹性，随压力增大液体释出增多， 合临床的方法，即将反义寡核苷酸混于各种胶或异分子共聚 减压后液体部分可重吸入凝胶囊内，有类似海绵样特性。观 物中涂于血管外壁，缓慢释放反义寡核苷酸以达到持续抑制 察恒温箱中染色凝胶上清液， 内出现染色， 内染色逐 1 1 24 1 血管内膜增生的效果，但研究和应用较多的是多聚凝胶。医 渐加重，随着时间延长其颜色渐变深。 用生物蛋白胶可模拟人体凝血最后阶段，形成乳白色蛋白凝 体外控释实验 其体外控释曲线如图 ，可以看出其携 2 .2 1 胶，将其与麻醉药混合应用于患者术后镇痛，效果良好。我 载的反义寡核苷酸可以缓慢释放，近72 1 时已基本完全释 们设想同样将反义药物溶于生物蛋白胶中，将胶直接涂于血 放。在整个过程中凝胶块在逐渐溶解，逐渐变小，至72 1 时 管外膜，使反义药物持续释放，从而达到理想地抑制血管内 已完全溶解。 膜增生的效果。 ! 材料和方法 实验材料 （）医用生物蛋白胶，规格 ，广州倍特 1. 1 1 2 .5 ml 生物技术有限公司制造；（）反义寡核苷酸 的反义 2 18 bp C- myc，由上海生工生物工程公司合成，序列为： 5GAA GCT CAC ；（） 紫外分光