中性甲醛和无醛固定液短中期固定组织应用GS脱水透明系列试剂组织处理效果比较评价.pdfVIP

3讨论 黑色素是由黑色素母细胞的粗面内质网和高尔基体合成的，是一种不含铁而含硫的色素，这种色素是 十分稳定的物质，完全不溶于水及有机溶剂，采用一般的固定和石蜡包埋均不会丢失【2j。有的标本黑色素 沉积在组织和细胞中，造成的组织结构和细胞形态的不清楚，细胞的异型性和核分裂相观察困难，棕黄色 的色素颗粒也给免疫组化染色造成假象，阳性定位的不确切，给疾病的诊断造成一定的困难。 在常规染色的基础上，如果因为色素沉积过多无法进行鉴别诊断的情况下，组织切片进行祛除黑色素 后再进行HE染色，可以大大提高诊断的准确性。作者应用该改良的祛除黑色素方法时间仅数分钟，不会延 迟报告的发放时间。我们在试验过程中，0．5％高锰酸钾处：理4rain，显微镜下观察HE染色黑色素祛除效果 不好，而高锰酸钾氧化5min祛除黑色素很彻底，为了尽量不给免疫组织化学染色造成太大影响，我们认为 高锰酸钾氧化5min既能较好的祛除黑色素，免疫组织化学标记效果也较好。 免疫组织化学染色上，作者认为组织抗原在一定耐受空间内不会过多丢失，能够较好的表达，该改良 l(i．67等抗体的标记，定位较准确，比没有祛除黑色素组织上标记结果更有利于诊断。所以我们认为该方法 祛除黑色素的处理，在组织抗原的耐受空间内，没有对组织抗原造成过多的丢失。 综上，在日常工作中，我们认为在黑色素影响诊断的情况下，此改良的快速祛除黑色素的方法有利于 疾病的诊断和免疫组织化学染色，是行之有效的方法。 参考文献 1． 吴秉铨，刘彦仿，周晓军，等．免疫组织化学病理诊断【M】．北京：北京科学技术出版社，2007·151．153． 2． 龚志锦，等．病理组织制片和染色技术【M】．上海：上海科学技术出版社，1993：185． 中性甲醛和无醛固定液短中期固定组织应用GS脱水 透明系列试剂组织处理的效果比较评价 何金朱维健徐毅 (上海市长征医院病理科。200003) 采用甲醛固定、乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡包埋和切片、苏木精一伊红染色的常规病理技术自创建以 来已有一百多年的历史，至今仍在临床病人和医学研究中广泛应用。为了社会的可持续发展，人们也更加 认识到环保的重要性，对健康和环境也有了更高的要求，。减少或完全替代甲醛和二甲苯毒害试剂的应用， 建立一套替代技术取代石蜡包埋切片中毒害试剂的使用是一项意义重大的工作，哈尔滨格林标本技术开发 有限公司经过长时间的研究探索，终于开发出了世界首创的全新病理技术平台一组织固定脱水系列套装试 剂，它是国内第一个专业厂家推出的第一套环保型套装系列试剂。我们应用GS无醛固定液和10％中性甲 醛同时进行短中期固定新鲜肿瘤组织，采用GS脱水透明系列试剂组织处理，然后进行常规HE染色、免 疫组化染色和荧光原位杂交检测，将此结果与临床病理传统方法的染色进行综合效果评价。 1材料和方法 1．1材料选择诊断明确的手术切除新鲜标本，乳腺癌4例、肺癌3例、结肠癌2例、卵巢癌2例。每例 水套装试剂的全自动组织处理机进行脱水透明浸蜡，常规包埋蜡块，待全部标本制备完成后，统一切片并 同时进行常规HE染色、免疫组化染色和荧光原位杂交检测。 1．2试剂GS无醛生物组织样本固定液、GS生物组织样本制备套液、GS生物组织样本切片染色套液有黑 EGFR基因扩增检测试剂盒购自北京金菩嘉医疗科技有限公司。 1．3方法 1．3．1临床病理传统酒精脱水、二甲苯透明、常规浸蜡包埋切片和全自动HE染色组织经常规10％中性 0：30；(13) 蜡C0：30；(14)蜡D1：30。常规石蜡包埋，切片厚4微米。全自动HE染色方法所有石蜡切片常规烤片后 AUTOSTAINER 均用Leica 5：00 5：00 3：00rnin(5)纯酒精0：30rain(6)95％ 二甲苯I min(3)脱蜡二甲苯IIrain(4)脱蜡二甲苯III 0：30 0：20 酒精1 rain(7)95％酒精11min(8)70％酒精0：20min(9)流水冲洗1：30min(10)苏木精4：00