鹅源禽Ⅰ型副黏病毒的分离与鉴定.pdfVIP

26 中国兽医杂志 2008年(第 44卷)第 11期 ChineseJournalofVeterinaryMedicine 鹅 源 禽 I型 副 黏 病 毒 的分 离 与 鉴 定 吕晓娟，俞 燕，龚建森，施祖灏，单燕菊，刘学贤 (中国农业科学院家禽研究所 ，江苏 扬州 225003) 中图分类号：$852．65—9．5 文献标识码 ：B 文章编号：0529—6005(2008)11-0026—02 鹅副黏病毒病是鹅的一种烈性传染病，该病使 48h之间死亡的鸡胚尿囊液。 10日龄 以内的雏鹅发病率和病死率均达到 100 ， 1．4 病毒鉴定 用血凝试验 (HA)测定收获 的鸡 平均发病率和病死率分别为 27．7 和 18．2 。 自 胚尿囊液。有血凝性时 ，再分别用 NDV 阳性血清、 l997年以来，我国江苏、浙江、广州 、福建、江西、安 AI(H5和 H9)阳性血清、ED 76阳性血清进行血 徽、上海等地鹅群相继暴发一种急性高度致死性传 凝抑制 (HI)试验。收集尿囊液作电镜观察。 染病，给水禽养殖带来巨大的经济损失。 1．5 鸡胚半数致死量 (ELDj。)的测定 取分离毒 我们从病死鹅脑、脾病料分离到 1株对禽类有 的第 4代尿囊液分别经 3000r／min离心 30min， 高致病率、高致死率的病毒。通过系列研究证明，所 取上清液用灭菌生理盐水作 1o倍梯度稀释，每个稀 分离的野外病毒为禽副黏病毒 I型鹅源禽副黏病毒 释度接种 1013龄 SPF鸡胚 5枚，每胚尿囊腔接种 (gooseparamyxovirus—I，GPMV—I)。为探 明该 0．1mL，37℃孵化，接种 24h后，每 4～6h照蛋 1 野外分离病毒 GPMV对鸡的致病性，研究了分离毒 次 ，观察 5d。收集死亡胚尿囊液作 HA试验并检 的血凝特性、鸡胚半数致死量、最小致死量病毒致死 查鸡胚病变 。未死亡鸡胚 于 96h冻死后 吸取尿囊 鸡胚的平均时间和 1日龄 SPF鸡脑 内接种致病指 液作 HA试验检测，按 Reed～Muench法计算鸡胚半 数 ；并采用人工感染的方式研究了野外分离毒对 30 数致死量 ELD 日龄非免疫雏鹅和雏鸡的致病性 ，通过攻毒鸡鹅同 1．6 致死鸡胚平均死亡时间 (MDT)的测定 取分 居等方式感染未接种 易感动物 ，以研 究分 离毒 离毒的第4代尿囊液用灭菌生理盐水连续 1O倍梯度 GPMV的传播方式。 稀释成 10 ～10一 。每个稀释度接种 5枚9日龄的 1 材料与方法 SPF鸡胚 ，每胚接种 0．1mL，置 37℃孵化。连续观察 1．1 抗原与血清 新城疫弱毒 LaSota株、标准强毒 7d，记录每枚鸡胚的死亡时间，计算其平均值 。 株 F1E9和新城疫病毒 LaSota株标准阳性血清，减蛋 1．7 对 1日龄 SPF鸡脑 内接种致病指数 (ICPI)的 综合征病毒 (EDsV)标准阳性血清等均来 自中国兽医 测定 将分离毒的第 4代尿囊液用灭菌生理盐水 药品监察所；禽流感病毒 (AIV)H5、H9亚型阳性血 1：1o稀释 ，微量注射器接种 8只 1日龄 SPF鸡 ，每 清，由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供。 只脑 内接种 0．05mL，同时设立对照组 4只，每只接 1．2 实验动物 SPF鸡和鸡胚由南京药械厂 SPF 种灭菌生理盐水 0．05mL，隔离饲养。每天按时观 鸡研究中心提供 ；鹅来源于高邮某种鹅场 (NDV非 察鸡群的健康状况 ，并对实验鸡进行评定 ：正常的记 免疫)；实验鸡、鹅均在隔离器中饲养-。 0分，发病的记 1分