恶性胶质瘤细胞在不同培养液和不同时期中CD133阳性细胞比率的变化.pdfVIP

ChinJClinNeurosci2008，16(6)，565-571 恶性胶质瘤细胞在不同培养液和不同时期中CD133 阳性细胞 比率的变化 花 玮 ，周良辅 一，毛 颖 ，肖保国 ，朱剑宏 ，王晓梅 ，姚 瑜 (复旦大学附属华山医院神经外科200040；复旦大学神经病研究所200040) 关键词 恶性胶质瘤：干细胞；CD133 摘要 目的：观察不同培养液及不同培养时期等因素对体外培养人脑胶质瘤细胞CD133阳性(CD133)细胞比率的影 响。方法：用干细胞培养液(含EGF、FGF一2、B27)培养6例原代胶质瘤细胞和3例对照细胞株，用流式细胞仪检测培 养第0、3、7、28、60、90和 120天时不同细胞的CD133细胞比率；免疫组化观察胶质瘤干细胞的多向分化能力；用 血清、无血清和干细胞3种培养液分别培养2例长期培养的胶质瘤SHG62、SHG66细胞系以及对照的U87和U251细胞 株 ，观察胶质瘤中CD133细胞在不同培养液中的相互转换。结果：胶质瘤CD133细胞比率随培养时间推移明显下降 (P0．05)，1周左右均降至1％的低水平，而细胞株则比较稳定；干细胞培养液培养的细胞中CD133细胞比率明显高 于血清和无血清培养液培养(尸0．01)；此外，胶质瘤细胞中的干细胞具有多向分化的能力，并且可以在干细胞和血清培 养液中互相转换。结论：原代胶质瘤体外培养过程中CD133细胞比率逐渐下降，而干细胞培养液能明显提高CD133 细胞比率，并且CD133细胞可以在不同培养液中相互转换。说明生长环境对干细胞比率影响较大，提示可能存在尚未 明了的影响干细胞生长分化的相关因子。 RatioofCD133PositiveExpressedCellsinM alignantGliomainDifferentM ediumsandCulturePhases inVitro HUA Wei，ZHOULiang—Fu，，MAO Ying，XIA0Bao—Guo，ZHUJian—Hong，WANG Xiao—Mei， 一◆论u～ YAO Yu DepartmentofNeurosurgery，HuashanHospital，FudanUniversity，Shanghai，200040， Institute ． ofNeurology，HuashanHospital，FudanUniversity，Shanghai200040，China 一～著一一 ◆ ¨ KEY WORDS glioma；stem cells；CD133 ABSTRACT Aim ：TofindthedynamicchangesofCD133(CD133positivelyexpressed)cellsinprimary cultureandalsoindifferentmediums．Methods：Sixprimarymalignantgliomacellsand3gliomacellstrains wereculturedinstemcellmediumfsupplementedwithEGF，FGF一2nadB27)，thentheirratiosofCD133cells werecheckedwithflowcytometryonday0,3，7，28，60，90，120respectively．Multipledifferentiationsofstem cellswereprovedbyimmunocytochemistry．ThenchangesoftheratiosofCDl33 cellsofSHG62．SHG66 flongterm culturedinourlaboratory)andU87，U251cellstrainsculturedinmedium withorwithoutserum andstem cellmedium wereobserved．Results：TheratiosofCD133 cellsinprimarygliomasdecreased evidentlywithtime(P0．05)，whilecellstrainsremainedstationarylevels．TheratioofCD133cellswashigher 文章编号 1008—0678(2008)06—0565—07 [中图分类号]R739．41 [文献标识码]A 基金项 目 国家 自然科学基金资助 (编号 作者简介 花玮，男(1982一)，博士研究生，