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布鲁氏菌疫苗接种羊白细胞层SSHCDNA文库构建
及溶菌酶基因克隆分析
李闯1，2徐云明1唐峰1邹德颖1刘楠楠1郭 兴1杨咏洁1，2卢士英1周玉1柳增善1鲁承2
任洪林1
1.人兽共患病研究教育部重点实验室吉林大学人兽共患病研究所，吉林长春130062
2.廷边大学农学院动物医学系，吉林延吉133002
摘要：布鲁氏菌病是一种重要的人兽共患病，近年疫情急骤回升，危害我国畜牧业的健康发
展。本研究以猪种布鲁氏菌S2疫苗株免疫雄性小尾寒羊，通过抑制性差减杂交技术构建白细
胞层SSHN(c)DNA文库。经测序和(B)LAST一致性搜索比对发现一段cDNA序列为溶菌酶重组片段，
该片段大小770bp，编码148个氨基酸残基，编码的蛋白是一种天然抗感染物质。已提交
(C)enBank录号为JX263305。LYZ溶菌酶是一种存在机体内必不可少的天然免疫因子，在布病
有效防控方面具有重要意义。
关键词：SSH差减文库；白细胞层；布鲁氏杆菌；溶菌酶
ConstructionofSSHcDNAlibraryfrombuffycoatofSmallTailHansheepinoculatedwith
Brucellastrainandgenecloneanalysisoflysozyme
LIChuang1,2XUYun-Ming1 TANGFeng1ZOUDe-Ying1LIUNan-Nan1GUOXing1
YANGYong-Jie1,2,LUShi-Ying1,ZHOUYU1,L1UZeng-Shan1,LUCheng2,RENHong-Lin1
1.KeyLaboratoryofZoonosisResearch,MinistryofEducation,InstituteofZoonosis,Jilin
University,Changchun130062,China
2.DepartmentofVeterinaryMedicine,AgriculturecollegeofYanbianUniversity,Yanji133002,
China
Abstract:BrucellosisisazoonoticdiseaseofBrucella,whichendangedseverelytheproductionof
stockbreedingandthehealthofhumanbeing.Inthisstudy,themaleSmallTailHansheepwas
inoculatedwithBrucellasuisS2vaccinestrains,theSuppressionSubtractiveHybridization(SSH)
librarywasconstructedfrombuffycoatofsheep.Aftertherecombinantplasmidsweresequenced,
thecDNAsequenceoftheconserveddomainoflysozyme(LYZ)wasrecognizedbasedon
BLASTsearchesinNCBI,withthesizeof770bp,andcontinuouslyencoding148aminoacid
residuals.TheLysozymewasfurtherprovedasaessentialnaturalimmunefactor,laidthe
foundationfortheeffectivepreventionandcontrolofbrucellosis.
Keywords:Buffycoat;Brucella;SuppressionSubtractiveHybridization(SSH);lysozyme
190 第十二届学术研讨会
布鲁氏杆菌是一种人兽共患病病原体Ⅷ，可感染人类，且侵害家畜的生殖系统和关节，
引起妊娠母畜流产、胎衣不下和各种组织的局部病灶l翻，公畜表现为睾丸炎及不育等，家畜
中发病率较高为牛、羊、猪。人布病临床表现多样，以发热、乏力、多汗、关节痛、肝脾大
等为主要表现，直接损伤生殖系统，造成不孕不育，严重影响正常的生产生活。布病主要传
染源为患病家畜，对动物饲养、兽医、肉品加工等从业人员危害严重Ⅷ。近年几布病疫情急
骤上升，与动物布病防控不利有着密切关系，因此有效防控及控制动物布病具有重要意义。
目前动物布病疫苗保护力不高，且国内发生多起因实施动物计划免疫而造
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