蛋白指纹图谱技术结合EPO-KB在骨肉瘤早期诊断与应用.pdfVIP

2012年中医药防治肿瘤学术年会 本文通过临床观察，益肺饮能明显改善老年晚期非小细胞肺癌患者的临床证候，提高 生活质量，且毒副反应小，耐受性，值得进一步深入研究。 蛋白指纹图谱技术结合EPO—KB在骨肉瘤早期诊断中的应用 古建立黄满玉丁幸坡张志勇 李东升郭建刚许京华 河南省洛阳正骨医院，正骨研究院骨肿瘤科，洛阳，471002 摘要：骨肉瘤是一种最常见的恶性骨肿瘤，为了确定血清中能对骨肉瘤早期诊断有意义 例，平均年龄19．3岁)、16例骨软骨瘤(男9例，女7例，平均年龄16．8岁)和26例正常 人(陛别、年龄与上两组匹配，所有受试人员均为巾围黄色人种)血清蛋白指纹图谱，发现 Da是丝 =100％，将这2个特异蛋白在蛋白质组学实验数据库(EPO—KB)中检索，发现6438 氨酸富集序列，参与多种细胞信号传导与肿瘤发生，而3954Da仍需进行下一步签定。我们 认为采用SELDI．TOF．MS方法筛选出的2个特异性蛋白可能为中国黄色人种骨肉瘤患者血 清中具有早期诊断价值的特异蛋白，在临床中可能具有诊断和、治疗检测及预后价值。 关键词：骨肉瘤；血清；肿瘤标记，生物学；蛋白质组 骨肉瘤是骨科最常见的恶性骨肿瘤，源于原始骨源性问叶组织细胞，以能产生骨样组织 基质的恶性成骨细胞为特征【1】。我院多年来主要对确诊患者采取术前及术后新辅助化疗并外 科根治性手术治疗。经过近5年临床病例回顾性研究，其1～5年生存率分别为：28％、32％、 14％、8％、18％，目前生存病例率约为50％【2】。我们总结化疗药物毒副作用较大，很多病人 因不能耐受而不得不停止化疗。近年来研究表明，化疗药物同抗生素药物一样，也能诱导肿 瘤耐药基因表达，从而使一部分骨肉瘤患者失去或减弱其化疗的治疗意义。所以，骨肉瘤生 存率的长期随访并没有大幅度提高【3】。正如著名肿瘤学者美国哈佛大学Mankin教授提出的， 骨肉瘤治疗目前正处在～卜字路口，必须寻求新的基础和临床医学途径。因此，如何引进先进 科学技术，为骨肉瘤的早期诊断和制定更有效、更有针对性的治疗方案提供新的依据很重要。 Laser 肉瘤早期诊断及用药指导提供帮助。我们搜集了2007年6月至2010年1月在我院治疗的 25例骨肉瘤患者、16例骨软骨瘤患者和26例正常人的血清样本进行SELDI．TOF．MS分析． 208 2012年中医药防治肿瘤学术年会 并将所发现的特异蛋白于蛋白质组学实验数据库(EPO．KB)检索，确定其对骨肉瘤早期诊断 的价值。 1材料与方法 1．1病倒与血清样本 选择河南省洛阳正骨医院2007～2010年共25例骨肉瘤患者，一经局部组织穿刺活检 确诊即抽取血标本，其中男14例，女1l例，平均年龄19．3岁。16例单发骨软骨瘤患者， 男9例，女7例，平均年龄16．8岁，及26例性别与年龄相匹配的健康志愿者血标本作为对 照，来源于本院职工及住院患者。所有受试人员均为中国黄色人种，汉族，签有知情同意书。 患者及正常对照的外周血清分装，每个样本约3ML，。80。C下冷藏备用。 1．2SELDI．TOF-MS图谱分析 1．2．2．1仪器及方法 c)及 用加有A11．in．one标准蛋白质的NP20芯片校正质谱仪，蛋白芯片生物系统(PBSII 其配套金属亲和表面芯片(IMAC3一Cu)购自美围(Ciphergen ProteinChip软件中设定读片程序读取芯片数据。每个样本随机分配到芯片中，采用双侧最 d,gqO定问变量分析。芯片阵列采用蛋白质生物系统(PBSIIC)确定蛋I：11组学指纹图谱，波 峰M／Z值以土s表示。 1．2．2．2数据分析 software 初步数据分析由ciphergenExpress 3．0完成。波峰强度之间比较采用T检验， 运用BiomarkerWizard和BioMarker