玉米赤霉烯酮快速间接竞争酶联免疫检测技术研究及应用.pdfVIP

上海农业学报 2015，3l(1)：92—95 ActaAgricuhuraeShanghai DOI：10．15955／j．issn1000-3924．2015．O1．21 文章编号2015)01-092—04 玉米赤霉烯酮快速间接竞争酶联免疫检测技术研究及应用 刘 刚 ，韩 铮。，聂冬霞 ，杨俊花 ，赵志辉 ，李和平 ，廖玉才 ，武爱波 (华中农业大学植物科学技术学院，麦类作物分子生物技术实验室，武汉430070； 上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所 ，上海201403) 摘 要 ：在获得高特异性单克隆抗体的基础上 ，通过间接竞争酶联免疫检测技术建立了一种在室温下 (25℃)快速、定量检测玉米赤霉烯酮的方法。该方法前处理简单，检测时间仅 30min，检出限为0．3~g／kg，线 性范围0．5—10Ixg／kg，回收率为76．7％～l04．2％。应用此方法测定了l6份小麦、玉米等谷物样品中玉米赤霉 烯酮的含量 ，其中小麦9份、玉米7份，检出率为69％，含量在5．12_-4o0．02I~g／kg，其中2份样品为阳性。同时 该 ELISA检测结果与 LC—MS／MS的验证结果无显著性差异。因此，该新型快速、定量的ELISA技术对小麦、玉米 样品中玉米赤霉烯酮的大范围筛查具有一定的应用价值。 关键词：玉米赤霉烯酮 ；酶联免疫吸附测定；快速检测 ；小麦；玉米 Developmentandapplicationoffastindirectcompetitive enzyme-linked immunosorbentassayofzearalenone LIUGang’，HANZheng，NIEDong—xia ，YANGJun—hua ，ZHAOZhi—hui， LIHe．ping ，LIAO Yu．cai，WU Ai_bo (MolecularBiotechnologyLaboratoryforWheat，BarleyandOats，CollegeofPlantScienceandTechnology， HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan430070，China；InstituteofAgro—FoodQualityStandardsand TestingTechnology，ShanghaiAcademyofAgriculturalSciences，Shanghai201403，China) Abstract：Amethodtorapidlyandquantitativelydetectzearalenoneatroom temperature(25℃)wasde- velopedbyindirectcompetitiveenzyme--linkedimmunosorbentassayonthebasisofobtainingthemonoclonalan-- tibodywithhighspecificity．Themethodwassimpleinpre—processing，30rainindetectingtime，0．3 txg／kginde— tectionlimit．0．5— 10 Ixg／kginlinearityrangeand76．7％一 1o4．2％ inrecoveryrate．Thedetectionof9wheat samplesand7maizesamplesbythemethodindicatedthatthedetectableratewas69％ ，thezearalenonecontents were5．12— 00．02 I~g／kg．andtwoofthem werepositive．Theabovedetectionresultswerenotsignificantlydif- ferentfrom theresultsdetectedby LC—MS／MS，SO themethod could beapplied to large-scale screeningof zearalenoneinmaizeandwheatsamples． Key